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1、目的:氧化應(yīng)激參與多種眼病發(fā)病機(jī)制中視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞死亡的調(diào)控。氧化鈰納米粒子是具備自催化活性的抗氧化納米粒子,在多種神經(jīng)損傷模型中表現(xiàn)出顯著的保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)旨在證實(shí)氧化鈰納米粒子對(duì)氧化損傷誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用,并探討其保護(hù)作用可能的作用機(jī)制。
方法:化學(xué)沉淀法制備粒徑分布合理并具備良好分散性的氧化鈰納米粒子,高分辨率透射電鏡等技術(shù)表征納米粒子的粒徑、晶格構(gòu)成、混合價(jià)態(tài)狀態(tài)等參數(shù)。選用視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞系RGC
2、-5的H2O2氧化損傷體外模型,分組比較并檢測(cè)RGC-5存活率、凋亡形態(tài)觀察和定量分析來(lái)證實(shí)氧化鈰納米粒子的保護(hù)作用。分別檢測(cè)各組中活性氧自由基含量、抗氧化酶表達(dá)、線粒體膜電位水平、胞漿和線粒體內(nèi)細(xì)胞色素c含量以及凋亡信號(hào)相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3表達(dá)來(lái)證實(shí)氧化鈰納米粒子發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的相關(guān)機(jī)制。
結(jié)果:化學(xué)沉淀法能制備出粒徑分布在5-10nm,具備+3和+4混合價(jià)態(tài)并且分散性良好的氧化鈰納米粒子。氧化鈰
3、納米粒子能有效的促進(jìn)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞氧化損傷后的存活率,減少氧化損傷誘導(dǎo)的凋亡形態(tài)學(xué)改變以及凋亡率。氧化鈰納米粒子能顯著的降低氧化損傷后細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基水平,提高細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶和總抗氧化能力,逆轉(zhuǎn)線粒體膜電位下降和細(xì)胞色素c從線粒體向胞漿釋放的趨勢(shì),并且能顯著的調(diào)控凋亡相關(guān)蛋白表達(dá):能降低氧化損傷后Bax/Bcl-2比例和細(xì)胞內(nèi)caspase-3表達(dá)。
結(jié)論:氧化鈰納米粒子能有效的保護(hù)氧化損傷誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡。這種
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