Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米顆粒的制備及分析.pdf

1、目的:Ang2體系廣泛表達于人類腫瘤的血管系統(tǒng)重構中,而在正常組織無明顯表達,使它成為一個在抗血管生成的癌癥治療中有吸引力的候選靶目標。我們前期已成功構建了Ang2-siRNA重組質(zhì)粒,用其轉(zhuǎn)染HUVECs可抑制Ang2的表達,構建了Ang2-siRNA慢病毒表達載體,用其感染惡性黑色素移植瘤可抑制血管的生成、生長。本課題在前期研究的基礎上,制備Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒,檢測殼聚糖磁性納米微粒的理化性質(zhì),Ang2-si

2、RNA質(zhì)粒與殼聚糖磁性納米微粒的結合情況,為下一步Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒靶向治療惡性黑色素瘤的體內(nèi)、外實驗提供實驗材料。
　　方法:
　　1、利用化學共沉淀法制備Fe3O4納米粒子。
　　2、利用乳化交聯(lián)法制備殼聚糖磁性納米微粒。
　　3、使用透射電鏡觀察殼聚糖磁性納米微粒的物理形態(tài)。
　　4、使用激光粒徑檢測儀檢測殼聚糖磁性納米微粒的粒徑分布。
　　5、進行殼聚糖磁性納米微粒的沉

3、淀實驗。
　　6、Ang2-siRNA質(zhì)粒表達載體與殼聚糖磁性納米微粒的結合分析。
　　結果:
　　1、制備的磁性Fe3O4納米粒子肉眼觀察下呈黑褐色顆粒狀粉末,具有良好的磁響應性。
　　2、制備的殼聚糖磁性納米微?？梢院芎玫姆稚⒂谡麴s水中,為黑褐色懸液,并具有良好的磁響應性,透射電鏡示顆粒以橢圓形和球形居多,另有少許不規(guī)則形,邊界明顯,微粒大小多為70nm左右,激光粒徑檢測儀顯示該樣品的微粒其粒徑范圍為55.2

4、~82.5nm,平均粒徑為67nm,且粒徑分布較窄。
　　3、磁性殼聚糖納米微粒可以在外加磁場作用下在液體中定向移動。
　　4、成功制備Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒。
　　結論:成功的制備出粒徑小、粒徑分布范圍窄的Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒,并且殼聚糖磁性納米微?？膳cAng2-siRNA質(zhì)粒表達載體很好的結合,為下一步進行Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒靶向治療惡性黑色素瘤的體內(nèi)