Ang2-siRNA質粒殼聚糖磁性納米微粒干預人惡性黑色素瘤細胞的體外研究.pdf

1、目的：制備Ang2-siRNA質粒殼聚糖磁性納米微粒，利用其RNA干擾作用，沉默人惡性黑色素瘤細胞Ang2基因的表達，體外研究其對人惡性黑色素瘤細胞中Ang2基因表達的抑制效率，為后期進一步進行裸鼠惡性黑色素移植瘤的血管生成和腫瘤生長的體內靶向性干預實驗奠定基礎，為Ang2-siRNA質粒殼聚糖磁性納米微粒在腫瘤靶向基因治療中的應用提供實驗依據(jù)。
　　方法：1.制備Ang2-siRNA質粒殼聚糖磁性納米微粒。
　　2.Ang

2、2-siRNA質粒殼聚糖磁性納米微粒體外轉染人惡性黑色素瘤細胞。
　　3.利用倒置熒光顯微鏡觀察人惡性黑色素瘤細胞紅色熒光蛋白表達情況，細胞計數(shù)并分析轉染效率。
　　4.實時熒光定量PCR檢測人惡性黑色素瘤細胞中Ang2基因的表達量，進而得到RNAi沉默Ang2基因表達的效率。
　　結果：1、成功制備Ang2-siRNA質粒殼聚糖磁性納米微粒。
　　2、利用倒置熒光顯微鏡觀察，轉染成功的人惡性黑色素瘤細胞發(fā)出紅色

3、熒光。
　　3、當質粒與殼聚糖磁性納米微粒質量比為1:100時，Ang2-siRNA質粒殼聚糖磁性納米微粒轉染人惡性黑色素瘤細胞的效率最高，可達61.17％。
　　4、實時熒光定量PCR結果：Ang2-siRNA質粒殼聚糖磁性納米微粒可有效沉默人惡性黑色素瘤細胞中Ang2基因的表達，其Ang2基因表達抑制效率可達到59.56%（P<0.05）。
　　結論：Ang2-siRNA質粒殼聚糖磁性納米微粒能以較高的轉染效率在體