腫瘤抗原TRAG-3的免疫識(shí)別及其免疫效應(yīng)研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文腫瘤抗原TRAG3的免疫識(shí)別及其免疫效應(yīng)研究姓名：朱波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（呼吸系?。┲笇?dǎo)教師：陳正堂吳玉章20030501第三軍醫(yī)大學(xué)博士研究生論文通過以上研究。我們發(fā)現(xiàn)：1TRAG一3抗原在非小細(xì)胞肺癌內(nèi)的表達(dá)及其誘導(dǎo)表達(dá)(1)TRAG3在非小細(xì)胞肺癌內(nèi)的表達(dá)及其臨床意義48例肺癌患者中，TRAG3表達(dá)陽性率為54％，其中脯腺癌73％、肺鱗癌t7％及大細(xì)胞肺癌33％，肺腺癌中的表達(dá)率與肺鱗癌相比有顯

2、著差異(P005)；腫瘤患者術(shù)前化療對(duì)TRAG3的表達(dá)無影響，而肺癌患者的腫瘤分期與TRAG一3的表達(dá)也無明顯的聯(lián)系。以上結(jié)果提示：TRAG3不能作為肺癌分期的診斷標(biāo)志，但發(fā)展基于TRAG一3抗原的免疫治療可望用于半數(shù)以上的非小細(xì)胞肺癌患者，尤其是肺腺癌患者，(2)DAC誘導(dǎo)肺腺癌A549細(xì)胞內(nèi)TRAG3的表達(dá)結(jié)果顯示：未經(jīng)任何處理的A549肺腺癌細(xì)胞內(nèi)TRAG3mRNA和蛋白表達(dá)均為陰性：10latool的DAC處理24h后，即見A5

3、49細(xì)胞內(nèi)mRNA和蛋白表達(dá)，直至7d仍可檢測到TRAG3表達(dá)。結(jié)合以往的報(bào)道，以上結(jié)果表明：DAC可望用于臨床增強(qiáng)肺癌細(xì)胞的免疫原性，可在免疫治療的前期應(yīng)用，從而在免疫治療階段更有效的被CTL識(shí)別。。2TRAG3來源HLAA21限制性CTL表位的鑒定(1)TRAG3來源HLAA21限制性CTL表位的預(yù)測①根據(jù)超基序方案預(yù)測原則，發(fā)現(xiàn)P2、P9位氨基酸殘基符合侯選表位標(biāo)準(zhǔn)的九肽共7個(gè)，分別是：GLIQLVEGV(412)、HAcwPAF

4、TV(37～45)、PAFTVLGEA(4149)、SILLRDAGL(5765)、ILLRDAGLV(5866)、PLSNNHPPT(7785)、QLGREKGPI(92～100)；②通過計(jì)算符合超基序方案的7個(gè)九肽的結(jié)合系數(shù)，符合HLAA21限制性CTL表位條件的九欣共有4個(gè)，它們是：ILLRDAGLVc58~66，(10004)、HACWPAFTV(37~45)(1827)、GLIQLVEGV4～12)(570)和SILLRDAG

5、L57～65)(860)。(2)預(yù)測表位肽的計(jì)算機(jī)輔助分子模擬TRAG一3來源的4個(gè)侯選CTL表位多膚均符合HLAA2艱割性CTL表位的標(biāo)準(zhǔn)；經(jīng)分子動(dòng)力學(xué)模擬發(fā)現(xiàn)，TRAG3c37q5，多肽的羧基末端氨基酸(P9)側(cè)鏈指向溶液，不符合HLA—A21限制性CTL表位的標(biāo)準(zhǔn)，而其余3個(gè)九肽的羧基末端氨基酸側(cè)鏈均指向HLAA21分子結(jié)合槽的凹槽F口袋中。(3)預(yù)測表位肽與HLA—A21分子的親和力分析FCAS分析發(fā)現(xiàn)，經(jīng)預(yù)測表位肽刺激后T2細(xì)