神經(jīng)干細(xì)胞移植治療脊髓全橫斷損傷的實驗研究.pdf

1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文神經(jīng)干細(xì)胞移植治療脊髓全橫斷損傷的實驗研究姓名：伍軍申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)外科學(xué)指導(dǎo)教師：方加勝20050501博士學(xué)位論文中文摘要目前國內(nèi)外對神經(jīng)干細(xì)胞治療脊髓損傷的實驗研究多集中在半橫斷損傷或脊髓挫傷模型的研究，治療全橫斷損傷模型少見。并且在修復(fù)脊髓與大腦的神經(jīng)通路方面，尤其是恢復(fù)皮質(zhì)脊髓束以重建肢體運動功能方面尚缺乏形態(tài)學(xué)上的直接證據(jù)，并鮮見基因水平的研究。因此神經(jīng)干細(xì)胞治療脊髓全橫斷損傷的作用及相應(yīng)修復(fù)

2、機制還有待進一步研究。本課題從神經(jīng)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)入手，應(yīng)用體外分離培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞移植治療脊髓全橫斷損傷模型，利用神經(jīng)束路示蹤技術(shù)觀察神經(jīng)干細(xì)胞移植對脊髓損傷后皮質(zhì)脊髓束再生及神經(jīng)突觸結(jié)構(gòu)重建的影響，從基因水平、形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能恢復(fù)三個方面來研究神經(jīng)干細(xì)胞移植對脊髓損傷的治療作用，為脊髓損傷的治療探討新的途徑，為治療效果提供評判標(biāo)準(zhǔn)，為臨床應(yīng)用研究提供實驗基礎(chǔ)。研究包括以下三個部分。一、神經(jīng)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定及體外長期培養(yǎng)耳的建

3、立游經(jīng)于細(xì)胞體外分離、培養(yǎng)鞠分化鑒定缽系。方法從胚胎大鼠的大腦皮層、室管臌下區(qū)和海馬等組織分離神經(jīng)干細(xì)胞，用無蠢清培養(yǎng)技術(shù)在體矯逶行培養(yǎng)、擴增、傳代，去除生長因子后誘等分純。利用Brdu檢測細(xì)胞的增殖能力。采用免疫熒光技術(shù)，鑒定神經(jīng)干細(xì)胞及分化的神經(jīng)細(xì)胞。同時在體外進行長期傳代培養(yǎng)和細(xì)胞凍存復(fù)蘇研究。綴采扶胚精大鼠豹大弦皮屢、室管貘下區(qū)和海馬縫織獲繕了大藿享孛經(jīng)干細(xì)胞，可自我增殖并分化表達(dá)神經(jīng)元、星彤膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的特異性抗原N