神經(jīng)干細(xì)胞移植治療大鼠視神經(jīng)損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、利用NSCs移植治療某些神經(jīng)系統(tǒng)疾病和損傷,已取得了成功.目前國(guó)際上有關(guān)NSCs移植治療視神經(jīng)損傷的研究報(bào)道極少,國(guó)內(nèi)還無(wú)人涉及.該實(shí)驗(yàn)采用無(wú)血清培養(yǎng)基對(duì)16-18d胎鼠腦室區(qū)/腦室下區(qū)(Ventricular Zone/Subventricular Zone,VZ/SVZ)NSCs進(jìn)行培養(yǎng)、增殖,鑒定后植入成年大鼠損傷的視神經(jīng)鞘膜內(nèi),在視神經(jīng)損傷后的不同時(shí)間點(diǎn)移入NSCs并在植入后的不同時(shí)間點(diǎn)觀察損傷視神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)和視傳遞功能的恢復(fù)情

2、況.探討了NSCs移植對(duì)視神經(jīng)損傷的治療效應(yīng).方法:采用機(jī)械分離法分散16-18d胎鼠VZ/SVZ組織,用無(wú)血清培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)、增殖;用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)Nestin(神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白)陽(yáng)性表達(dá).應(yīng)用鉗夾法制作大鼠視神經(jīng)損傷模型.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物共分為三大組:Ⅰ組:陰性對(duì)照組,視神經(jīng)損傷后不施加任何影響因素;Ⅱ組:陽(yáng)性對(duì)照組,傷后局部注射堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)800A

3、u,分為3個(gè)亞組:ⅡA組(傷后立即注射bFGF),ⅡB組(傷后1wk注射bFGF)和ⅡC組(傷后4wk注射bFGF);Ⅲ組:治療組,視神經(jīng)損1傷后局部注射NSCs1×10<'6>個(gè),亦分為3個(gè)亞組:ⅢA組(傷后立即注射NSCs),ⅢB組(傷后1wk注射NSCs)和ⅢC組(傷后4wk注射NSCs).所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均在術(shù)后1wk和4wk制作損傷視神經(jīng)電鏡標(biāo)本,觀察超微結(jié)構(gòu)改變,同時(shí)檢測(cè)閃光視覺(jué)誘發(fā)電位(flashvisual evoked p