神經干細胞移植治療大鼠視神經損傷的實驗研究.pdf

1、利用NSCs移植治療某些神經系統(tǒng)疾病和損傷,已取得了成功.目前國際上有關NSCs移植治療視神經損傷的研究報道極少,國內還無人涉及.該實驗采用無血清培養(yǎng)基對16-18d胎鼠腦室區(qū)/腦室下區(qū)(Ventricular Zone/Subventricular Zone,VZ/SVZ)NSCs進行培養(yǎng)、增殖,鑒定后植入成年大鼠損傷的視神經鞘膜內,在視神經損傷后的不同時間點移入NSCs并在植入后的不同時間點觀察損傷視神經超微結構和視傳遞功能的恢復情

2、況.探討了NSCs移植對視神經損傷的治療效應.方法:采用機械分離法分散16-18d胎鼠VZ/SVZ組織,用無血清培養(yǎng)基進行培養(yǎng)、增殖;用免疫細胞化學方法檢測Nestin(神經上皮干細胞蛋白)陽性表達.應用鉗夾法制作大鼠視神經損傷模型.實驗動物共分為三大組:Ⅰ組:陰性對照組,視神經損傷后不施加任何影響因素;Ⅱ組:陽性對照組,傷后局部注射堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)800A

3、u,分為3個亞組:ⅡA組(傷后立即注射bFGF),ⅡB組(傷后1wk注射bFGF)和ⅡC組(傷后4wk注射bFGF);Ⅲ組:治療組,視神經損1傷后局部注射NSCs1×10<'6>個,亦分為3個亞組:ⅢA組(傷后立即注射NSCs),ⅢB組(傷后1wk注射NSCs)和ⅢC組(傷后4wk注射NSCs).所有實驗動物均在術后1wk和4wk制作損傷視神經電鏡標本,觀察超微結構改變,同時檢測閃光視覺誘發(fā)電位(flashvisual evoked p