規(guī)?；?chǎng)的牛病毒性腹瀉凈化評(píng)估與病原分析.pdf

1、牛病毒性腹瀉是由牛病毒性腹瀉病病毒(BVDV)是危害養(yǎng)牛業(yè)生產(chǎn)的重要病原之一。感染40天至妊娠期120天的母牛，即使妊娠期滿后能順利產(chǎn)下?tīng)倥＃藭r(shí)的小牛卻對(duì)該病毒有“免疫耐受”現(xiàn)象，并且將轉(zhuǎn)變?yōu)槿后w中新的傳染源（持續(xù)感染牛，PI），妊娠期母?？赏ㄟ^(guò)通過(guò)這種方式產(chǎn)生的持續(xù)感染小牛(PI)是在群體中重要的傳染源。由于PI牛者經(jīng)常發(fā)生病毒血癥并會(huì)持續(xù)向環(huán)境中排放病毒，因此其識(shí)別和從牧群中消滅PI牛是控制和根除BVDV的程序的重要組成部分。<

2、br>　　本研究以在奶缸中取出的樣本檢測(cè)BVDV抗體來(lái)評(píng)估牧場(chǎng)牛群的BVDV感染情況，結(jié)合檢測(cè)奶樣的結(jié)果了解了BVD在黑龍江省內(nèi)一部分地方的流行情況。通過(guò)抗體檢測(cè)結(jié)果確定了目標(biāo)凈化牛場(chǎng)，制定了合理的凈化程序，將對(duì)目標(biāo)凈化牧場(chǎng)全群牛只進(jìn)行BVDV抗原檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的牛只，2～3周后對(duì)其進(jìn)行重新采樣檢測(cè)（為了排出一過(guò)性感染的干擾）如果再次采樣抗原檢測(cè)還為陽(yáng)性，建議對(duì)該牛只進(jìn)行淘汰。然后采取長(zhǎng)時(shí)間的群體抗體監(jiān)測(cè)是否有較大的抗體水平的波動(dòng)

3、，以判斷是否有PI牛的存在以便及時(shí)進(jìn)行抗原篩查以及提高飼養(yǎng)管理水平等綜合有效的生物安全管理措施保證根除的有效性。利用IDEXX BVDV抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)了從黑龍江不同地區(qū)的未接種過(guò)BVDV疫苗的規(guī)模化牧場(chǎng)中收集的大缸奶56份，其中52份大缸奶中檢測(cè)到BVDV抗體，占總檢測(cè)數(shù)的92.85％。證明了BVD在黑龍江省流行的嚴(yán)重情況。利用IDEXX BVDV抗原檢測(cè)試劑盒共檢測(cè)奶牛耳部切口組織樣品，完成了對(duì)目標(biāo)凈化牛場(chǎng)PI牛的初步篩查工作。P

4、I牛占檢測(cè)總數(shù)的4.23％。通過(guò)PI牛的血清和糞便進(jìn)行了病毒分離，并成功在牛腎細(xì)胞上分離出病毒。對(duì)分離得到的病毒進(jìn)行了電鏡觀察、理化特性和一部分相關(guān)生物學(xué)特性的研究并繪制了分離毒株的一步生長(zhǎng)曲線。利用RT-PCR擴(kuò)增出了5'UTR區(qū)的一段特異性片段。通過(guò)與公開(kāi)的BVDV參考序列進(jìn)行比對(duì)以及利用RT-PCR分型引物確定分離病毒的類型，確定為BVDV1型毒株并命名為X0619。通過(guò)與其它31株BVDV毒株和2株CSFV毒株的核苷酸序列成功構(gòu)