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文檔簡(jiǎn)介
1、本文從以下幾方面進(jìn)行了詳細(xì)闡述。
第一部分?jǐn)y抗P-selectin靶向超聲造影劑的制備及體外尋靶實(shí)驗(yàn)研究。
目的:制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,并研究其體外尋靶能力。
方法:采用“生物素-親和素”橋接法制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,檢測(cè)其基本特性。應(yīng)用不同劑量重組人白介素-4(rhIL-4)和組胺聯(lián)合刺激人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)表達(dá)P-selectin,用免疫熒光檢測(cè)
2、P-selectin的表達(dá)水平并探尋rhIL-4最適刺激劑量。靶向超聲造影劑、同型對(duì)照超聲造影劑和空白超聲造影劑分別與經(jīng)最適劑量rhIL-4和組胺聯(lián)合刺激的HUVECs及未作處理的HUVECs進(jìn)行體外尋靶實(shí)驗(yàn)。
結(jié)果:成功制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,平均粒徑為(2.24±0.71)μm,平均Zeta電位為(-2.75±0.84)mV,濃度為(3.0±0.3)×109個(gè)/ml,抗體結(jié)合率高達(dá)99.80%;免疫熒光
3、檢測(cè)結(jié)果顯示rhIL-4和組胺能成功刺激HUVECs表達(dá)P-selectin,并探尋出rhIL-4最適刺激劑量;體外尋靶實(shí)驗(yàn)顯示靶向超聲造影劑能較好地粘附在經(jīng)最適劑量rhIL-4和組胺聯(lián)合刺激的HUVECs表面,與其它組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:采用“生物素-親和素”橋接法成功制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,該造影劑在體外能有效地粘附在經(jīng)rhIL-4和組胺聯(lián)合刺激的HUVECs表面。
第二部分?jǐn)y抗P-
4、selectin靶向超聲造影劑體內(nèi)超聲分子成像研究。
目的:制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,并研究其評(píng)價(jià)心肌缺血再灌注損傷的超聲分子成像效果。
方法:采用“生物素-親和素”橋接法制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,建立犬心肌缺血再灌注模型,隨機(jī)先后(間隔30 min)注入攜抗P-selectin靶向超聲造影劑(MBp)和空白超聲造影劑(MBc),注入10 min后,行心肌聲學(xué)造影檢查,采圖、存盤。
5、應(yīng)用DFY型超聲圖像定量分析診斷儀中的彩色編碼技術(shù)對(duì)存儲(chǔ)的圖像進(jìn)行脫機(jī)處理,觀察MBp體內(nèi)超聲分子成像效果。
結(jié)果:成功制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑及建立犬心肌缺血再灌注模型;彩色編碼圖像顯示:MBp行心肌聲學(xué)造影可于缺血再灌注區(qū)心肌見顯著造影增強(qiáng),MBc于缺血再灌注區(qū)心肌造影無明顯增強(qiáng)。
結(jié)論:應(yīng)用攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,于體內(nèi)行心肌聲學(xué)造影檢查能準(zhǔn)確檢測(cè)在灌注治療后的心肌缺血再灌注損
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