帶有連接臂的微泡超聲造影劑的制備研究.pdf

1、超聲造影劑(Ultrasound contrast agents,UCA)的出現,開創(chuàng)了無創(chuàng)傷超聲醫(yī)學的一個嶄新領域,除了作為超聲診斷藥劑之外,近年來還發(fā)現微泡超聲造影劑具有分子成像、促進血栓溶解、促進基因轉染及藥物體內運輸定點釋放等作用.而這些作用的實現,需要制備出能夠高效攜帶靶向因子、抗體、基因等的新型微泡超聲造影劑.本文通過在微泡膜材料中加入聚乙二醇的方法,制備出了一種帶有連接臂的新型具備靶向能力的微泡超聲造影劑,并對該造影劑進行

2、了體外心肌重構模型靶向實驗研究及體內成像研究,本文主要工作如下: (1)實驗在考慮聚合物微泡造影劑組分的無毒性、生物相容性、溶血性等問題的基礎上,確定了聚合物超聲造影劑微泡主要膜材料、乳化劑、穩(wěn)定劑等其它輔助材料及用量.即:膜材料聚乙二醇6000(15.0﹪),吐溫80(3.5﹪),葡萄糖(1.0﹪),連接臂聚乙二醇400(1.0﹪),水相:油相=79:21. (2)研究了微泡的制備及保存.通過觀察超聲聲振膜溶液所得微泡

3、性質及所需聲振時間,確定微泡最佳制備條件,即:超聲功率600W,聲振時間3min.對微泡室溫保存方法進行了初步探討,發(fā)現聚乙烯醇可以延長微泡室溫保存時間. (3)借助Image-Pro Plus 5.0.2,Photoshop軟件及其它輔助工具,對實驗制備的帶連接臂聚合物微泡造影劑的粒徑分布及濃度進行了分析測定.測得實驗制備出的包裹空氣的造影劑平均粒徑為3.43 μm,濃度為3.56×10<'9>個/mL；包裹六氟化硫氣體的造影

4、劑平均粒徑為2.87μm,濃度為7.65×10<'9>個/mL.同時,對微泡進行分級,得到1-7 μm不同粒徑段的分布更為集中造影劑微泡. (4)通過連接抗體明膠酶A(MMP-2)和明膠酶B(MMP-9),測定了自制超聲造影劑的靶向性能,微泡連接抗體的實驗條件為40℃孵育30min,結合后穩(wěn)定時間在2h以上.熒光顯微鏡下觀察,抗體與微泡緊密結合,牢固性良好,組織切片特異性抗原結合體外實驗進一步表明微泡與抗體結合能力極佳.

5、 (5)對帶有連接臂聚合物超聲造影劑行動物實驗,測定了造影劑超聲顯影情況.分別采用實驗犬和大白鼠作為實驗對象,動物犬超聲顯影實驗過程中,可觀察到實驗犬左右心室、心肌均有明顯顯影增強.實驗中同時發(fā)現空氣微泡顯影時間相對于六氟化硫微泡要短,說明低彌散度的氣體有利于微泡穩(wěn)定.取犬血氣分析,未見異?，F象,說明本造影劑有左右心室造影的功能,造影安全.大白鼠靜脈注射造影劑后,左右心室顯影增強,可觀測到心肌成像.實驗中,未發(fā)現大白鼠有異常現象,造影劑