長春西汀鼻用殼聚糖微球的研制.pdf

1、目的:腦血管病是威協(xié)人類健康的最嚴重疾病之一,無論兒童、青年或是中老年均可發(fā)病,它具有發(fā)病率高、死亡率高、致殘率高、復發(fā)率高及并發(fā)癥多的特點,己經(jīng)嚴重影響了患者的生存狀態(tài)和生活質(zhì)量。長春西汀(vinpocetine)治療腦梗塞、腦出血后遺癥及腦動脈硬化癥等多種類型的循環(huán)障礙性腦血管疾病效果顯著,并可用于改善腦功能、增強記憶、改善情緒,延緩腦衰老,長期應用安全性和耐受性極高。長春西汀是一種吲哚類生物堿,因該藥在水中溶解度極低,而且人體內(nèi)肝

2、臟細胞對長春西汀具有極強的代謝作用,其市售普通口服制劑存在嚴重的肝臟首過效應,生物利用度很低[1]。為了提高生物利用度和患者順應性,本文研究制備了長春西汀殼聚糖微球鼻腔給藥制劑,鼻腔給藥具有方便,吸收迅速,起效快的優(yōu)點,而且長春西汀的分子量為350.5,脂溶性較高,屬于難溶性藥物,給藥劑量為10-15 mg/日,具有適宜的油水分配系(10gKa/W=3.56),適宜黏膜給藥。載體材料殼聚糖有良好的生物粘附性,可以延長藥物與鼻黏膜的接觸時

3、間,促進藥物吸收。
　　 方法:本文用殼聚糖微球的常用制備方法--乳化交聯(lián)法制備了長春西汀殼聚糖微球,對處方進行單因素考察,并以微球粒徑分布、載藥量、包封率為綜合評價指標,采用四因素三水平正交實驗設計,確定最佳制備工藝。用光學顯微鏡和掃描電鏡觀察微球的外觀形態(tài),粒徑大小和分布,探討微球的成形機理?？疾煳⑶蜥尫判袨?并對按最佳處方得出的釋藥行為,進行釋藥模型擬合。
　　 黏膜粘附性及纖毛毒性考察:以在體蟾蜍上腭黏膜纖毛為動

4、物模型,通過測定纖毛持續(xù)運動時間來評價長春西汀殼聚糖微球的纖毛毒性;通過測定纖毛輸送速率來評價微球的黏膜黏附能力。
　　 穩(wěn)定性實驗:將最佳處方的長春西汀殼聚糖微球分別進行高溫、高濕、強光條件下影響因素實驗,進行微球初步穩(wěn)定性研究。在室溫下,密封放置6個月,測定微球外觀、含量及釋放度,考察其長期穩(wěn)定性。
　　 體內(nèi)藥代動力學實驗:選用大鼠為實驗動物,分別采用長春西汀靜脈注射、其殼聚糖微球鼻腔給藥兩種不同的給藥途徑進行體內(nèi)

5、藥動學研究。采用高效液相色譜法測定血漿中藥物濃度,采用腦組織勻漿法測定腦內(nèi)藥物含量,用3p97藥代動力學程序軟件處理數(shù)據(jù),計算藥代動力學參數(shù),并用梯形法計算AUC0-∞。結(jié)合各給藥途徑藥代動力學參數(shù),分析長春西汀殼聚糖微球鼻腔給藥的體內(nèi)吸收過程。
　　 結(jié)果:通過對處方和制備工藝的單因素考察,發(fā)現(xiàn)殼聚糖濃度,攪拌速度和投藥量,交聯(lián)劑用量對微球的粒徑,包封率,載藥量影響較大,通過四因素三水平正交實驗,篩選出長春西汀殼聚糖微球的優(yōu)化

6、制備工藝和處方。對按優(yōu)化處方和工藝制備的三批微球進行考察,結(jié)果表明該制備工藝穩(wěn)定,重現(xiàn)性良好。光學顯微鏡下觀察微球外觀圓整,粒徑分布均勻,平均粒徑為43.72±1.70μm,載藥量為7.73±0.29％;使用掃描電鏡觀察到微球表面圓整,有少許藥物晶體。
　　 體外釋放研究結(jié)果表明:微球釋藥行為符合Higuchi模型,從釋藥曲線可以看出微球突釋明顯,有利于藥物的鼻腔吸收。黏膜粘附性及纖毛毒性研究結(jié)果表明,殼聚糖微球的纖毛輸送速率為

7、與碳粒的基礎輸送速率相比顯著降低,說明殼聚糖微球黏膜粘附性能良好。在體蟾蜍上顎給予殼聚糖微球后,纖毛持續(xù)擺動時間和生理鹽水對照組和無纖毛毒性的鹽酸偽麻黃堿組相比,持續(xù)擺動時間略有下降,但不影響其用于鼻腔給藥。
　　 初步穩(wěn)定性實驗:在相對濕度92.5％條件下,第五天和第十天的吸濕增重均大于5％,而且顏色變深;相對濕度75％條件下,吸濕增重小于5％,顏色基本不變。在高溫60℃條件下,微球釋放度,含量,外觀均無明顯變化。但在強光45

8、00±500 lx下,微球含量下降,應避光保存。長期實驗將微球于室溫下密封放置6個月期間,外觀、含量、釋藥曲線均無顯著變化。
　　 大鼠體內(nèi)藥物動力學研究:以大鼠為試驗動物,分別尾靜脈注射長春西汀注射液和鼻腔給予長春西汀殼聚糖微球,體內(nèi)實驗藥物動力學結(jié)果表明,靜脈注射給藥后,血漿中vinpoctine分布動力學符合二室模型;鼻腔給藥后,血漿中vinpoctine分布動力學符合單室模型;注射和鼻腔給藥后腦組織中vinpoctine

9、分布動力學都符合單室模型。從主要藥動學參數(shù)可以看出鼻腔給藥后血漿半衰期由0.80h延長至1.52h;腦組織內(nèi)藥物半衰期由1.48h延長至1.85h;絕對生物利用度達56.5％;血漿AUC(0-6h)為靜脈注射的0.57倍,但腦組織AUC(0-6h)為靜脈注射的1.08倍;鼻腔給藥后DTI是靜脈注射給藥的1.89倍。本實驗表明長春西汀殼聚糖微球鼻腔給藥后吸收迅速,半衰期延長,生物利用度高,并具有一定的腦靶向性。
　　 結(jié)論:本課題