脂聯(lián)素表達與TNF-α關系的研究.pdf

1、研究目的和背景：代謝綜合征(metabolicsyndrome，MS)是由相互作用的內臟型肥胖、異常的糖代謝、血脂紊亂、增高的血壓等所組成。這些組分均獨立地增加心血管疾病(cardiovasculardisease．CVD)的危險，尤其是增加動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)疾病如缺血性心臟病和腦中風的危險。而MS的各個組分聯(lián)合起來還對心血管并發(fā)癥有協(xié)同作用。近年來人們一致認為，胰島素抵抗(insulinresista

2、nce．IR)是連接MS與CVD之間關系的一個關鍵因素，并且發(fā)現(xiàn)，內臟脂肪組織在IR過程中發(fā)揮了最重要的作用。脂肪組織是重要的內分泌器官，可以分泌許多生物活性物質，這些物質共同被稱為脂肪因子。大量研究證實，內臟脂肪組織中促炎脂肪因子和抗炎脂肪因子合成失調與IR有相關關系，而且對多種CVD的發(fā)病有明顯的促進作用。而脂聯(lián)素是近年來發(fā)現(xiàn)的一種極為重要的脂肪因子，基本上只由脂肪細胞所分泌，具有抗炎和心血管保護特性。許多研究發(fā)現(xiàn)，在MS中該因子的

3、表達是下調的。然而，脂肪組織中脂聯(lián)素表達發(fā)生改變的機制還相當不清楚． 近來研究證實肥胖者脂肪組織所具有的特征之一是滲透到其中的巨噬細胞量增多，該組織中rNF-o分泌旺盛，并且?guī)缀醵紒碜杂诰奘杉毎?。肥胖者體內脂肪組織十分豐富，因此rNF-cl的表達量相當大，一方面它進入血液成為肥胖者循環(huán)中該因子的一個主要來源，對包括心血管在內的其它器官系統(tǒng)產(chǎn)生不利影響；另一方面TNF-Q可以在脂肪組織局部發(fā)揮著致炎作用。已經(jīng)有文獻報道在某些病理

4、條件下巨噬細胞與其他類型的細胞之間的存在著局部相互作用，作為最重要的炎癥介質之一，很多研究證實TNF-Q可以通過一系列特定的途徑對大量的細胞因子的表達有調節(jié)作用。作為近年發(fā)現(xiàn)的脂聯(lián)素，其在脂肪細胞中的表達是否會受到來自于巨噬細胞的TNF-Q影響?目前沒有明確的答案。因此，本課題立足于通過動物試驗檢測脂聯(lián)素的表達情況，分析其與TNF-Q的關系。另外通過脂肪細胞培養(yǎng)研究TNF-Q對脂聯(lián)素表達的影響。 研究方法：(1)將30只雄性SD

5、大鼠隨機分成對照組和高脂組，分別用普通飼料和高脂飼料飼養(yǎng)10周，在第10周時分別檢測兩組大鼠體重、體內脂肪量、血清中血脂及炎癥因子TNF-(I水平，同時取大網(wǎng)膜脂肪組織作RT-PCR研究脂聯(lián)素mRNA的表達情況。(2)取雄性SD大鼠大網(wǎng)膜及雙側腎臟周圍脂肪組織，提取前脂肪細胞并進行培養(yǎng)，經(jīng)誘導使其轉化為脂肪細胞，在細胞誘導分化后第8天分別以不同濃度的重組TNF-Q以及羅格列酮干預培養(yǎng)36小時，最后測量所培養(yǎng)的脂肪細胞中脂聯(lián)素mRNA表達

6、情況，并收集培養(yǎng)上清液測量脂聯(lián)素濃度。 結果：(1)與對照組比較，高脂組大鼠體重、附睪及腹膜后脂肪組織量均顯著上升；血清TG、TC及TNF-u,水平均顯著增高，高脂組大鼠脂肪組織脂聯(lián)素mRNA表達水平顯著低于對照組，且相關性分析顯示脂聯(lián)素mRNA表達與體重、腹膜后及附睪脂肪組織量、血清TG及TN-F-u,水平呈顯著的負相關關系；(2)TNF-o．對培養(yǎng)的脂肪細胞脂聯(lián)素表達的影響：分別以不同濃度的TNF-~作用于培養(yǎng)成熟脂肪細胞3

7、6小時后，脂聯(lián)素mRNA的表達水平均顯著低于對照組，同時培養(yǎng)上清液中脂聯(lián)素水平亦顯著低于對照組；并且TN~-ol,的作用濃度越大，脂肪細胞中脂聯(lián)素mRNA的表達水平及上清液中脂聯(lián)素濃度越低下；羅格列酮可以阻止TNF-o[,對脂聯(lián)素表達的抑制作用。 結論：高脂飲食誘導的肥胖大鼠脂肪組織中脂聯(lián)素mRNA表達水平下降，而循環(huán)中TNF-~的濃度上升，兩者之間存在著顯著的負相關關系；TN'F-o[能直接抑制脂肪細胞中脂聯(lián)素mRNA的表達，