TIM-1對哮喘小鼠氣道黏液細(xì)胞化生及MUC5AC的影響.pdf

1、研究目的：研究T細(xì)胞免疫球蛋白-黏蛋白-1(TIM-1)在哮喘時Th2細(xì)胞分化及氣道黏液細(xì)胞化生中的作用，初步探討其作用機制。
　　 研究方法：
　　 ①BuxcoPFT系統(tǒng)檢測抗原誘導(dǎo)哮喘小鼠肺功能改變，以氣道阻力(Raw)評估小鼠氣道反應(yīng)性；
　　 ②流式細(xì)胞儀檢測外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)TIM-1+細(xì)胞比例；
　　 ③HE染色檢測肺泡灌洗液(BALF)中炎性細(xì)胞數(shù)；
　　 ④ELISA

2、檢測肺泡灌洗液中Th2細(xì)胞因子IL-13表達水平；
　　 ⑤阿辛藍-過碘酸雪夫(AB-PAS)染色觀察氣道基底層黏液細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)黏液量。
　　 ⑥RT-PCR檢測肺組織黏蛋白MUC5ACmRNA表達水平。
　　 研究結(jié)果：
　　 ①抗原誘導(dǎo)的哮喘小鼠Raw明顯升高，經(jīng)鼻滴入小鼠TIM-1特異抗體后，Raw明顯下降，顯著低于哮喘小鼠，但高于正常小鼠。
　　 ②流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示，哮喘小鼠PBMC

3、s中TIM-1+細(xì)胞比例高于正常組小鼠，經(jīng)TIM-1抗體治療后，TIM-1+細(xì)胞比例明顯低于哮喘組。
　　 ③哮喘小鼠氣道炎性細(xì)胞明顯浸潤，鼻腔滴入TIM-1抗體24小時后炎性細(xì)胞明顯下降，高于正常組。
　　 ④哮喘組BALF中IL-13表達顯著高正常組，TIM-1組IL-13表達水平回降，低于哮喘組，高于正常組；
　　 ⑤哮喘小鼠氣道黏液細(xì)胞增多，氣道上皮可見大量紫紅色的黏液細(xì)胞形成，且黏液細(xì)胞體積增大；滴注T

4、IM-1抗體后，哮喘小鼠氣道黏液細(xì)胞明顯減少。
　　 ⑥哮喘小鼠肺組織MUC5ACmRNA表達水平較正常組明顯升高，經(jīng)鼻滴入TIM-1抗體后水平明顯下降。
　　 ⑦氣道MUC5AC表達與TIM-1+細(xì)胞表達均呈正相關(guān)，r=0.946，P=0.004。
　　 研究結(jié)論：
　　 抗原誘導(dǎo)的哮喘小鼠外周血單個核細(xì)胞TIM-1+細(xì)胞比例明顯升高，IL-13表達增加，氣道炎性細(xì)胞明顯浸潤；黏蛋白MUC5AC表達增加