戊四氮點燃模型中RhoGTP酶與苔蘚纖維出芽相關性的研究.pdf

1、目的：動態(tài)觀察戊四氮（PTZ）慢性點燃模型組和Rho激酶抑制劑法舒地爾（fasudil）干預組中Rho GTP酶家族成員Racl和RhoA在海馬各區(qū)的表達變化及苔蘚纖維出芽的程度，探討Rho GTP酶及其參與的信號通路在苔蘚纖維出芽過程中發(fā)揮的作用，并推斷法舒地爾對癲癇的可能作用。 方法： 1）健康雄性SD大鼠（體重約200克）210只隨機分為PTZ組（n=84）、法舒地爾干預組（n=84）和生理鹽水對照組（n=42）。

2、PTZ組大鼠每日腹腔注射閾下劑量PTZ30mg/kg，制作點燃癲癇模型；干預組先腹腔注射法舒地爾15mg/kg，半小時后注射PT230mg/kg；對照組腹腔注射等量無菌生理鹽水。根據(jù)Racine標準判定癲癇發(fā)作的程度。選取第一次給藥后1天、3天、1周、2周、4周、6周和8周為研究時間點，將三組分成七個亞組，以海馬CA3區(qū)和齒狀回門區(qū)為研究部位。 2）不同時間點行Timm染色觀察齒狀回門區(qū)和海馬CA3區(qū)苔蘚纖維出芽情況。

3、3）免疫組化方法檢測各時間點海馬各區(qū)Racl、RhoA的表達變化。 結(jié)果： （1）癲癇行為學觀察：PTZ組和法舒地爾干預組在癇性發(fā)作級別，出現(xiàn)癇性發(fā)作時間和點燃率上均無明顯差異。 （2）苔蘚纖維出芽的動態(tài)變化：在各時間點，PTZ組和干預組之間CA3區(qū)苔蘚纖維出芽評分無明顯差異，兩組中除第1天外其余各時間點與對照組相比均有顯著差異（P<0.05）。從3天起評分漸增，達高峰時間為2周并且維持至8周。齒狀回顆粒細胞上區(qū)

4、苔蘚纖維出芽評分為0～1分，且各時間點之間及與對照組之間比較無差異。對照組CA3區(qū)和齒狀回顆粒細胞上區(qū)苔蘚纖維出芽評分均僅0～1分，各時間點之間無差異。 （3）在對照組大鼠海馬齒狀回、門區(qū)、CA1和CA3區(qū)均有Racl、RhoA的表達，免疫陽性細胞主要在CA3區(qū)的錐體細胞和門區(qū)。 ①Racl的表達： PTZ組和干預組中Racl蛋白表達的變化趨勢基本一致（p<0.05）。與對照組比較，兩組中Racl在3天時表達開始

5、增加，2周時達高峰，4周和6周維持在較高水平，8周時表達有所下降，但仍高于對照組水平，p<0.05。 ②RhoA的表達： PTZ組和干預組中RhoA蛋白表達的變化趨勢基本一致（p<0.05），與對照組比較，兩組中RhoA在1周時表達開始增加，4周時達高峰，6周時維持在較高水平，8周時下降至接近1周水平，p<0.05。 結(jié)論：PTZ點燃大鼠海馬Racl和RhoA表達增加參與了苔蘚纖維出芽過程；法舒地爾對Racl和R