老年大鼠全腦缺血再灌注損傷的機(jī)理研究及金屬硫蛋白的保護(hù)作用.pdf

1、近年來,缺血性腦血管病(ICVD)的發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì).為了深化ICVD的研究,應(yīng)用缺血再灌注動(dòng)物模型模擬人類ICVD,探討ICVD發(fā)病機(jī)制、開發(fā)藥物、開拓治療新途徑已成為神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域重大課題之一.腦缺血再灌注損傷中神經(jīng)元出現(xiàn)凋亡和壞死兩種死亡形式,對(duì)缺血后的神經(jīng)元選擇凋亡或壞死而言,很大程度上可能依賴于缺血這種損傷因素的強(qiáng)弱,較輕微和溫和的腦缺血損傷可能以誘發(fā)細(xì)胞凋亡為主,劇烈的腦缺血損傷則以細(xì)胞壞死為主,其中對(duì)凋亡發(fā)生及其調(diào)控機(jī)

2、制的研究日益受到重視;在缺血損傷中海馬各區(qū)的病變具全腦缺血變化的全部特點(diǎn),并出現(xiàn)易損性和抵抗性兩種截然不同的現(xiàn)象,因而一直成為神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn),對(duì)其深入研究有利于闡明中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷機(jī)制,盡管目前對(duì)其選擇易損性的機(jī)制還不十分清楚,但自由基損傷學(xué)說已越來越受到人們的關(guān)注,自由基清除劑和抗氧化劑的研究也在不斷地深入.目前,有關(guān)腦缺血損傷方面的文章報(bào)道較多,但以老年動(dòng)物為研究對(duì)象,來探討老年性腦缺血損傷的病理機(jī)制的文獻(xiàn),國(guó)內(nèi)外報(bào)道均甚

3、少.而隨著高齡社會(huì)的發(fā)展,老年人口的數(shù)量劇增,老年性疾病已成為全球普遍關(guān)注的問題之一.因此研究老年大鼠全腦缺血-再灌注損傷中海馬神經(jīng)元的死亡形式及金屬硫蛋白-1(MT-1)對(duì)缺血誘發(fā)細(xì)胞凋亡的抑制作用有較大的理論意義和社會(huì)價(jià)值.該研究中以老年大鼠為研究對(duì)象,青年大鼠為對(duì)照;全腦缺血-再灌注動(dòng)物模型采用了股動(dòng)脈放血并雙側(cè)頸總動(dòng)脈夾閉法.應(yīng)用光鏡、電鏡及免疫組化技術(shù)(Tunel法、Caspase-3法)觀察了腦缺血再灌注后海馬神經(jīng)元病理形態(tài)

4、學(xué)的變化,并結(jié)合腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力及丙二醛(MDA)含量的測(cè)定,綜合研究了細(xì)胞凋亡在老年大鼠全腦缺血-再灌注損傷中對(duì)海馬神經(jīng)元的影響;同時(shí)觀察了腹腔注射MT-1對(duì)海馬病變的影響.研究結(jié)果表明:在短暫性全腦缺血中,海馬錐體細(xì)胞存在著凋亡和壞死兩種死亡形式,細(xì)胞凋亡在海馬各區(qū)中的分布是一動(dòng)態(tài)過程,各區(qū)對(duì)缺血易損傷性的順序是:CA<,1>及門區(qū)>CA<,2>>CA<,3>>齒狀回;腦缺血再

5、灌注不同時(shí)程,海馬錐體細(xì)胞中DNA斷裂及Caspase-3的表達(dá)與細(xì)胞凋亡呈現(xiàn)相似的變化趨勢(shì),且DNA的斷裂早于Caspase-3的表達(dá);與青年組相比,老年組海馬神經(jīng)元出現(xiàn)凋亡時(shí)間早且損傷嚴(yán)重;MT-1能抑制海馬神經(jīng)元的凋亡,減輕腦損傷,有較好的腦保護(hù)作用.該研究從缺血損傷的形態(tài)學(xué)角度和基因及蛋白質(zhì)水平,并結(jié)合腦組織中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量及抗氧化酶SOD、GSH-Px活力的測(cè)定,側(cè)重從自由基損傷的角度初步探討了老年大鼠腦缺血海馬神經(jīng)