堿性成纖維細胞生長因子對大鼠脊髓缺血再灌注損傷后的保護作用.pdf

1、目的： 觀察應用外源性堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)對脊髓缺血再灌注損傷后的作用。 方法： 72只健康雄性成年大鼠，隨機分為正常對照組(n=24)，生理鹽水組(n=24)和bFGF治療組(n=24)。通過阻斷腹主動脈建立脊髓缺血再灌注損傷模型，于損傷平面經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔置細導管，bFGF治療組分別于恢復血流前10min，恢復血供后6h、12h、24h

2、、48h經(jīng)細導管注入bFGF,10mg/kg。生理鹽水組在相同時間注入等量生理鹽水，然后不同時間處死動物取材(n=4)。光學顯微鏡觀察脊髓組織病理變化；硫代巴比妥酸法測定血漿和脊髓組織丙二醛含量；全自動生化分析儀測定血漿肌酸磷酸激酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和乳酸脫氫酶含量；放射免疫法測定脊髓組織勻漿內(nèi)皮素水平；差速離心法測定細胞線粒體鈣含量；取部分脊髓測定組織濕/干重比值；TUNEL法檢測細胞凋亡；免疫組化檢測脊髓組織p53表達的變化情況。

3、 結(jié)果： (1)光鏡觀察：和bFGF治療組相比較，生理鹽水組脊髓神經(jīng)元明顯退變，減少、溶解或壞死。尼氏體變淺或消失。脊髓灰質(zhì)出現(xiàn)片狀出血灶，大量膠質(zhì)細胞浸潤； (2)恢復血流灌注1h，生理鹽水組與正常對照組比較，血漿和脊髓的各項生化指標顯著增高(P<0.05)；使用bFGF后，血漿及脊髓各項測定指標較生理鹽水組比較明顯降低(P<0.05)。 (3) TUNEL染色顯示：bFGF治療組24h、48h、72h、96h