絲素材料裝載堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)后的促細(xì)胞生長(zhǎng)作用.pdf

1、近年來家蠶絲素由于其獨(dú)特的理化性能已被作為組織修復(fù)用生物材料進(jìn)行,在用作細(xì)胞培養(yǎng)載體、傷口輔料、人工皮膚及組織工程支架材料等方面已顯示出良好的效果和潛在開發(fā)應(yīng)用前景。生長(zhǎng)因子亦為近年來的關(guān)注熱點(diǎn)。堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)能夠促進(jìn)了毛細(xì)血管增生,改善局部微循環(huán)及組織營(yíng)養(yǎng)狀況,促進(jìn)肉芽組織迅速生長(zhǎng),促使創(chuàng)面愈合。本文對(duì)裝載堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)的家蠶絲素膜和多孔材料的體外促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)作用以及其對(duì)SD大鼠背部真皮缺損創(chuàng)面的修復(fù)作

2、用進(jìn)行了研究。主要內(nèi)容如下：
　　 ⑴制備裝載bFGF的家蠶絲素膜,通過體外細(xì)胞培養(yǎng),研究了L929細(xì)胞在裝載bFGF的家蠶絲素膜的生長(zhǎng)情況,細(xì)胞形態(tài)觀察和MTT比色法的測(cè)定結(jié)果表明細(xì)胞種植天數(shù)相同的情況下,裝載bFGF的家蠶絲素膜上細(xì)胞的活力大于未裝載bFGF的家蠶絲素膜和膠原對(duì)照組。
　　 ⑵冷凍干燥法制備裝載bFGF的絲素多孔材料,用該材料作為培養(yǎng)L929細(xì)胞的載體,MTT測(cè)定細(xì)胞活力,結(jié)果表明該材料對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和

3、增殖有促進(jìn)作用。共聚焦顯微鏡(CLSM)觀察結(jié)果顯示,L929細(xì)胞在裝載bFGF的絲素多孔材料上的增殖好于未裝載bFGF的絲素多孔材料。在細(xì)胞接種密度相同時(shí),CLSM觀察L929細(xì)胞轉(zhuǎn)染攜帶綠色熒光蛋白(GFP)的Ad-GFP-VEGF165腺病毒的結(jié)果可知,在裝載bFGF的絲素多孔材料中生長(zhǎng)的L929細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率優(yōu)于未裝載bFGF的絲素多孔材料上的L929細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。
　　 ⑶在SD大鼠真皮缺損部位植入裝載bFGF的絲素

4、多孔材料和未裝載bFGF的絲素多孔材料,在植入后第5,11,15,28天分別取材料植入部位及附近組織標(biāo)本,進(jìn)行HE染色和Masson染色,觀察其炎癥反應(yīng)、成纖維細(xì)胞數(shù)量、新生毛細(xì)血管數(shù)量、材料與新生組織的融合情況和新生組織的形態(tài)。結(jié)果表明,無論是裝載bFGF的絲素多孔材料還是未裝載bFGF的絲素多孔材料其炎癥反應(yīng)均輕微,能夠支持大鼠真皮組織的再生,15天時(shí)在多孔材料與組織的交界處就有較豐富的新生毛細(xì)血管,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),新生毛細(xì)血管、成