Keap1與RelA相互作用及生理功能的研究.pdf

1、RelA是轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的一個(gè)亞基。有數(shù)量驚人的信號(hào)能夠激活NF-κB，它們包括細(xì)菌，病毒和真菌的產(chǎn)物以及炎癥細(xì)胞因子，氧化壓力，治療用的藥物。NF-κB靶基因在細(xì)胞幸存和增殖，先天和獲得性免疫中扮演很重要的角色。NF-κB是一把雙刃劍。雖然這個(gè)轉(zhuǎn)錄因子對環(huán)境的各種壓力條件做出適當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng)答非常重要，但增強(qiáng)的NF-κB活性導(dǎo)致慢性炎癥和癌癥。急性或慢性的神經(jīng)退化紊亂，動(dòng)脈硬化癥，及其它很多疾病也是因?yàn)镹F-κB激活失控所致。減弱的N

2、F-κB激活也與一些人類疾病有關(guān)，比如過多的色素。因此，NF-κB活性必須被緊密地調(diào)控。
　　 對NF-κB途徑的控制比簡單的IKK介導(dǎo)的調(diào)控IκB-NF-κB相互作用要復(fù)雜的多。例如，RelA和p50被泛素化，乙?；透彼岙悩?gòu)化作用調(diào)節(jié)，RelA和c-Rel的轉(zhuǎn)錄活性受磷酸化作用的影響。泛素連接酶泛素化和降解NF-κB亞基是一個(gè)調(diào)控NF-κB介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄的新穎的和重要的機(jī)制。
　　 Keapl是一個(gè)BTB Kelch蛋白

3、，是轉(zhuǎn)錄因子Nrf2的負(fù)調(diào)節(jié)因子。通過它的BTB和Kelch結(jié)構(gòu)域與Cul3和Nrf2結(jié)合，Keapl-Cul3-Rocl復(fù)合物促進(jìn)Nrf2的泛素化降解。
　　 Nrf2作為轉(zhuǎn)錄因子與抗氧化反應(yīng)元件ARE作用，調(diào)控ARE依賴的第1I相解毒酶基因和抗氧化基因的轉(zhuǎn)錄活性。目前認(rèn)為Nrf2是調(diào)控細(xì)胞對抗外來異物和氧化損傷的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，Nrf2缺失或激活障礙，會(huì)引起細(xì)胞對應(yīng)激源的敏感性增高，與化學(xué)促癌的發(fā)生、炎癥修復(fù)進(jìn)程延長、細(xì)胞調(diào)亡

4、等病變過程密切相關(guān)。
　　 我們在前期的工作中采用酵母雙雜交技術(shù)，以RelA為誘餌，篩選成人肝cDNA文庫，得知Keapl與RelA存在相互作用的可能。隨后進(jìn)行的熒光共定位、免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了相互作用的真實(shí)性。由于ReIA能夠被泛素化降解，而Keapl可以介導(dǎo)Nrf2的泛素化，我們很自然的推測Keapl與RelA之間的相互作用也可能與泛素化降解有關(guān)。然而熒光素酶報(bào)告基因測試和泛素化實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻沒有印證我們的猜想。目前有一種