誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C在舌癌淋巴轉(zhuǎn)移中的表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、舌癌(Carcinomaoftongue)是發(fā)生于舌粘膜的鱗狀上皮的惡性腫瘤，是最常見(jiàn)的口腔癌。因舌體具有豐富的淋巴管和血液循環(huán)，加以舌的機(jī)械運(yùn)動(dòng)頻繁，舌癌常發(fā)生于早期的頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，而目前主要的治療方法是手術(shù)治療，但術(shù)后復(fù)發(fā)率高，常造成患者語(yǔ)言、進(jìn)食、呼吸等基本生活功能障礙及顏面頸部畸型，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量和心理狀態(tài)，對(duì)于舌癌的侵襲及復(fù)發(fā)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機(jī)制仍未明確。但目前已經(jīng)知道血管生成及癌周淋巴管的生成在腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移中起著重要作

2、用。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)在眾多實(shí)體腫瘤中可檢測(cè)到誘導(dǎo)型一氧化酶(induciblenitricoxidesyntlaase，iNOS)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C(vascularendothelialgrowthfactor—C，VEGF-C)的過(guò)度表達(dá)，這兩者在腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移過(guò)程中都有較強(qiáng)的促進(jìn)血管形成和淋巴管形成的作用。 一氧化氮(nitricoxide，NO)是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)催化

3、底物左旋精氨酸合成的一種具有多種生物學(xué)活性的氣體分子，它既具有第二信使和神經(jīng)遞質(zhì)的功能，又是殺傷腫瘤細(xì)胞的效應(yīng)分子。NOS有三種亞型，分別由不同的基因編碼，即神經(jīng)元型NOS(neuronalNOS，nNOS)，誘導(dǎo)型NOS(inducibleNOS，iNOS)和內(nèi)皮型(endothelialNOS，eNOS)。其中iNOS在NO介導(dǎo)的腫瘤生長(zhǎng)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移起主要作用，并在人體多種腫瘤組織中檢測(cè)到它的過(guò)度表達(dá)。VEGF是一組分泌性糖蛋白，可

4、調(diào)節(jié)血管發(fā)生，淋巴管生成及血管、淋巴管通透性。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)VEGF家族成員之一VEGF—C通過(guò)與其受體VEGFR-3結(jié)合，在腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。 近年來(lái)，VEGF—C和iNOS在腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移發(fā)展過(guò)程中的作用已受到關(guān)注，并在多種腫瘤中表達(dá)上調(diào)，在目前國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)中對(duì)舌癌及淋巴轉(zhuǎn)移中iNOS和VEGF-C的表達(dá)情況及相互間聯(lián)系的研究尚少見(jiàn)報(bào)道。 研究目的： 本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)iNOS、VEGF—C

5、在舌癌中的表達(dá)情況，揭示iNOS、VEGF—C的相互關(guān)系及其和微淋巴管密度(LVD)以及舌癌臨床病理特征之間的關(guān)系，探討兩者在舌癌發(fā)生發(fā)展及淋巴轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用及兩者之間可能存在的相互作用機(jī)制，為舌癌的抗淋巴轉(zhuǎn)移的治療提供理論基礎(chǔ)。 材料和方法： 1、標(biāo)本收集 收集自2000—2007年在中山二院手術(shù)切除的舌癌標(biāo)本60例，患者術(shù)前未經(jīng)任何治療。 2、實(shí)驗(yàn)方法 用S—P免疫酶染色法檢測(cè)iNOS，VE

6、GF-C。 3、結(jié)果判斷 所有切片均經(jīng)過(guò)病理科醫(yī)生協(xié)助觀察，細(xì)胞的胞漿或者胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性，細(xì)胞核著藍(lán)色為陰性。iNOS和VEGF-C的結(jié)果判斷根據(jù)高倍鏡下陽(yáng)性細(xì)胞所占比例及著色強(qiáng)度綜合制定免疫組化半定量記分。按Weidner法進(jìn)行微淋巴密度計(jì)數(shù)，計(jì)算3個(gè)200倍視野淋巴管的總數(shù)作為該例的LVD值。 4、統(tǒng)計(jì)分析 計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)或精確概率法比較兩組或多組間陽(yáng)性率的差別。計(jì)量資料分別采用t檢

7、驗(yàn)和單因素方差分析進(jìn)行兩組與多組之間樣本均數(shù)的比較。P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。P<0.01為差異有明顯差異性。上述檢驗(yàn)均采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1、iNOS、VEGF—C在舌癌中的表達(dá) iNOS在正常舌組織、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌的陽(yáng)性表達(dá)率分別為：0、26.67％、53.33％，P<0.05，各組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；VEGF—C在正常舌組織、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌、有

8、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為0、30.00％、63.33％，P<0.05，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；正常舌組織、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌中的LND計(jì)數(shù)分別為1.0、16.43、25.86，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2、iNOS、VEGF—C和LND的關(guān)系 24例iNOS陽(yáng)性表達(dá)的舌癌中微淋巴管密度為20.50±2.50，36例iNOS陰性表達(dá)的舌癌中微淋巴管密度為13.40±3.30，P<0.05，

9、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。28例VEGF-C陽(yáng)性表達(dá)的舌癌中微淋巴管密度為27.60±3.50，32例VEGF—C陰性表達(dá)的舌癌中微淋巴管密度為16.80±3.70，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、iNOS、VEGF—C與舌癌臨床病理特征的關(guān)系 iNOS表達(dá)與舌癌大小，臨床分期，等臨床病理特征無(wú)關(guān)，與轉(zhuǎn)移有關(guān)；VEGF—C表達(dá)與舌癌大小，臨床分期等臨床病理特征無(wú)關(guān)，與轉(zhuǎn)移有關(guān)。 4、iNOS與VEGF—C在舌癌中表

10、達(dá)的相關(guān)性 iNOS與VEGF—C在舌癌中表達(dá)的相關(guān)性經(jīng)過(guò)Spearman檢驗(yàn)，相關(guān)系數(shù)0.668，P<0.05，兩者呈正相關(guān)。 結(jié)論： 1、iNOS有促進(jìn)舌癌癌周淋巴管形成的作用，且與舌癌的淋巴轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系。 2、VEGF—C有促進(jìn)舌癌癌周淋巴管形成的作用，且與舌癌的淋巴轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系。 3、iNOS與VEGF—C有著密切的關(guān)聯(lián)性，VEGF—C水平和iNOS活性，以及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的出現(xiàn)之間