高糖及LPS對HUVECs中NF-κB和MCP-1表達的影響及利拉魯肽的干預(yù)研究.pdf

1、目的：觀察胰高糖素樣肽-1(GLP-1)類似物利拉魯肽(liraglutide，LRL)對高糖及脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(Human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)增殖、凋亡及核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear factor-kappaB，NF-κ B)和單核細胞趨化蛋白1(monocyte chemoattractant Protein

2、-1，MCP-1)表達的影響，以探討LRL對糖尿病動脈粥樣硬化的保護作用及機制。
　　方法：選擇體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞，細胞傳至第5代，隨機分為7組：正常對照組(NG組)，高糖組(HG組)，LPS組，高糖+LPS組(HGS組)，高糖+LRL組(HGL組)，LPs+LRL組(LPSL組)，高糖+LPS+LRL組(HGSL組)，分別培養(yǎng)后，收集細胞，采用CCK-8法檢測不同組間及LRL干預(yù)組與未干預(yù)組細胞的增殖情況；采用流式細胞儀檢

3、測不同組間及LRL干預(yù)組與未干預(yù)組HUVECs的凋亡率的變化；采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測不同組間及LRL干預(yù)組與未干預(yù)組細胞中NF-κ B、MCP-1 mRNA表達水平的變化；采用Western blot方法檢測不同組間LRL干預(yù)組與未干預(yù)組細胞中NF-K B、MCP-1蛋白表達水平的變化。
　　結(jié)果：(1)CCK-8法檢測HUVECs的增殖結(jié)果：與NG組相比，HG組、LPS組、HGS組增殖受到抑制(P<0.0

4、5)，經(jīng)LRL干預(yù)后各組細胞的增殖抑制情況較相應(yīng)的未干預(yù)組得到減輕(P<0.05)。
　　(2)流式細胞術(shù)檢測HUVECs凋亡率結(jié)果：HG組、LPS組、HGS組HUVECs凋亡率較NG組顯著升高(P<0.05)，經(jīng)LRL干預(yù)后各組細胞的凋亡率分別較相應(yīng)的未干預(yù)組降低(P<0.05)。
　　(3)RT-PCR法檢測HUVECs中NF-κ B、MCP-1mRNA水平結(jié)果：HG組、LPS組、HGS組HUVECs的NF-κ B、MC

5、P-1的mRNA水平較NG組升高(P<0.05)：經(jīng)LRL干預(yù)后的各組分別較相應(yīng)的未干預(yù)組NF-κ B、MCP-1的mRNA水平降低(P<0.05)。
　　(4)Western blot法檢測HUVECs中NF-κ B、MCP-1蛋白水平結(jié)果：HG組、LPS組、HGS組HUVECs的NF-κ B、MCP-1的蛋白質(zhì)水平較NG組升高(P<0.05)；經(jīng)LRL干預(yù)后的各組分別較相應(yīng)的未干預(yù)組NF-κ B、MCP-1的蛋白質(zhì)水平降低(P