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
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文檔簡介
1、本文對牛磺鵝去氧膽酸(Taurochenodeoxycholicacid,TCDCA)的抗炎作用機理、免疫藥理學及藥代動力學進行了研究。 TCDCA抗炎作用機理研究采用Freund’s完全佐劑誘導Wistar大鼠AA動物模型,經(jīng)灌胃給藥后,測量致炎前和致炎后不同時期大鼠足跖腫脹度,并采用熒光分光光度法和ELISA雙抗夾心法分別檢測AA大鼠外周血中NO、LTB4及IL-1β、IL-6、TNF-ot含量。試驗結果表明,TCDCA連續(xù)
2、給藥21d,可顯著抑制AA大鼠不同時期的足跖腫脹,顯著降低血清中NO水平,顯著提高血清中IL-1β、IL-6、TNF-a含量;TCDCA連續(xù)給藥4d,可顯著降低外周血中LTB4含量。因此,TCDCA的抗炎作用與其抑制LTB4和NO產(chǎn)生有關。 TCDCA免疫藥理學研究采用重量法測定正常小鼠和從大鼠胸腺指數(shù)、脾指數(shù);采用血清溶血素分光光度法測定了小鼠血清中溶血素含量,比濁法測定了AA大鼠血清中IgG含量,流式細胞術雙抗標記法測定了小
3、鼠外周血中CD4+、CD8+和CDl9+淋巴細胞百分含量,遲發(fā)型變態(tài)反應法測定了小鼠耳殼腫脹度,碳廓清法測定了小鼠外周血中單核一巨噬細胞吞噬功能,比濁法測定了小鼠血清中溶菌酶含量以及ELISA雙抗夾心法測定了AA大鼠外周血GM-CSF含量。試驗結果表明,TCDCA可顯著抑制正常小鼠和AA大鼠免疫器官重量,提高小鼠血清溶血素含量,降低AA大鼠外周血中IgG含量,提高小鼠外周血中CD4+、CDl9+細胞百分率及CD4+/CD8+比值,抑制小
4、鼠遲發(fā)型變態(tài)反應,增強小鼠外周血中單核一巨噬細胞吞噬功能和提高小鼠血清中溶菌酶含量;TCDCA連續(xù)給藥4d,可顯著提高AA大鼠血清中GM-CSF的含量。因此,TCDCA對機體的免疫功能具有調(diào)節(jié)作用。 TCDCA在大鼠體內(nèi)的藥代動力學研究采用薄層掃描法(TLC)。固定相為薄層層析用硅膠G;流動相為氯仿:異丙醇:36%乙酸:水(30:30:4:1v/v/v/v);顯色劑為3.5%磷鉬酸和20%硫酸;可見光檢測,λs=528nm,λm
5、=620nm的條件下,測定了大鼠口服TCDCA后的血中濃度及藥代動力學參數(shù)。試驗結果表明,TCDCA在血清中2.5~25μg/ml濃度范圍內(nèi)呈良好線性關系,相關系數(shù)達0.9993,平均回收率為99.38%,相對標準偏差(RSD)為2.42%,TCDCA最低檢測限為50ng,最低檢出濃度為2μg/ml,日間RSD均小于10.0%。 按0.2g/kg·b·w大鼠單劑量一次灌胃TCDCA,用薄層掃描法測定了給藥后不同時間血清中TCDC
6、A的濃度,經(jīng)DASverl.0藥代動力學軟件處理數(shù)據(jù)。結果表明,TCDCA在大鼠體內(nèi)的藥代動力學特征符合有吸收一室模型,其藥代動力學方程為C=20.161(e-0.053t-e-2.996t),藥代動力學參數(shù)為Tmax6.0h,Cmax23.356mg/L,T1/2α13.010h,T1/2kα0.23lh,Ka2.996h-1,ke0.053h-1,CL/F0.529L/h/kg,AUC302.390mg/L*h,Vd/F9.920L
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