TCDCA抗炎免疫藥理學(xué)及藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、本文對(duì)牛磺鵝去氧膽酸(Taurochenodeoxycholicacid,TCDCA)的抗炎作用機(jī)理、免疫藥理學(xué)及藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究。 TCDCA抗炎作用機(jī)理研究采用Freund’s完全佐劑誘導(dǎo)Wistar大鼠AA動(dòng)物模型，經(jīng)灌胃給藥后，測(cè)量致炎前和致炎后不同時(shí)期大鼠足跖腫脹度，并采用熒光分光光度法和ELISA雙抗夾心法分別檢測(cè)AA大鼠外周血中NO、LTB4及IL-1β、IL-6、TNF-ot含量。試驗(yàn)結(jié)果表明，TCDCA連續(xù)

2、給藥21d，可顯著抑制AA大鼠不同時(shí)期的足跖腫脹，顯著降低血清中NO水平，顯著提高血清中IL-1β、IL-6、TNF-a含量；TCDCA連續(xù)給藥4d，可顯著降低外周血中LTB4含量。因此，TCDCA的抗炎作用與其抑制LTB4和NO產(chǎn)生有關(guān)。 TCDCA免疫藥理學(xué)研究采用重量法測(cè)定正常小鼠和從大鼠胸腺指數(shù)、脾指數(shù)；采用血清溶血素分光光度法測(cè)定了小鼠血清中溶血素含量，比濁法測(cè)定了AA大鼠血清中IgG含量，流式細(xì)胞術(shù)雙抗標(biāo)記法測(cè)定了小

3、鼠外周血中CD4+、CD8+和CDl9+淋巴細(xì)胞百分含量，遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)法測(cè)定了小鼠耳殼腫脹度，碳廓清法測(cè)定了小鼠外周血中單核一巨噬細(xì)胞吞噬功能，比濁法測(cè)定了小鼠血清中溶菌酶含量以及ELISA雙抗夾心法測(cè)定了AA大鼠外周血GM-CSF含量。試驗(yàn)結(jié)果表明，TCDCA可顯著抑制正常小鼠和AA大鼠免疫器官重量，提高小鼠血清溶血素含量，降低AA大鼠外周血中IgG含量，提高小鼠外周血中CD4+、CDl9+細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值，抑制小

4、鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，增強(qiáng)小鼠外周血中單核一巨噬細(xì)胞吞噬功能和提高小鼠血清中溶菌酶含量；TCDCA連續(xù)給藥4d，可顯著提高AA大鼠血清中GM-CSF的含量。因此，TCDCA對(duì)機(jī)體的免疫功能具有調(diào)節(jié)作用。 TCDCA在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究采用薄層掃描法(TLC)。固定相為薄層層析用硅膠G；流動(dòng)相為氯仿：異丙醇：36％乙酸：水(30：30：4：1v/v/v/v)；顯色劑為3.5％磷鉬酸和20％硫酸；可見(jiàn)光檢測(cè)，λs=528nm，λm

5、=620nm的條件下，測(cè)定了大鼠口服TCDCA后的血中濃度及藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果表明，TCDCA在血清中2.5～25μg/ml濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)達(dá)0.9993，平均回收率為99.38％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.42％，TCDCA最低檢測(cè)限為50ng，最低檢出濃度為2μg/ml，日間RSD均小于10.0％。 按0.2g/kg·b·w大鼠單劑量一次灌胃TCDCA，用薄層掃描法測(cè)定了給藥后不同時(shí)間血清中TCDC

6、A的濃度，經(jīng)DASverl.0藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。結(jié)果表明，TCDCA在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征符合有吸收一室模型，其藥代動(dòng)力學(xué)方程為C=20.161(e-0.053t-e-2.996t)，藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為T(mén)max6.0h，Cmax23.356mg/L，T1/2α13.010h，T1/2kα0.23lh，Ka2.996h-1，ke0.053h-1，CL/F0.529L/h/kg，AUC302.390mg/L*h，Vd/F9.920L