巨噬細胞集落刺激因子及白細胞介素-1β在體外受精-胚胎移植助孕中的作用分析.pdf

1、背景及目的:
　　 隨著不孕不育夫婦的增多,人類輔助生殖技術(shù)(Assisted ReproductiveTechnology ART)也獲得了廣泛的應(yīng)用,體外受精-胚胎移植技術(shù)(in VitroFertilization-embryo Transfer:IVF-ET)是其中的代表技術(shù),隨著生殖醫(yī)學(xué)研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)人類生殖過程不僅受神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響,而且還受到生長因子和細胞因子的調(diào)節(jié)。巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)是造

2、血系統(tǒng)細胞因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的一個重要成員,在體內(nèi)廣泛分布,不單對體內(nèi)多種疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān),也參與卵泡、胚胎及滋養(yǎng)細胞等生殖系統(tǒng)的調(diào)控,對生殖過程產(chǎn)生重要影響。白細胞介素-1β(IL-1β)又稱淋巴細胞激活因子,是最先發(fā)現(xiàn)的參與下丘腦-垂體-卵巢功能調(diào)節(jié)的因子,通過多種途徑對生殖進行調(diào)節(jié)。至今為止,有關(guān)M-CSF與IL-1β對與激素及體外受精助孕的影響研究多集中在取卵日卵泡液及血清中的變化,結(jié)果還有爭議。本研究旨在研究M-CSF及IL-1

3、β在助孕過程中的變化及其與性激素的變化關(guān)系,在顆粒細胞上的表達及助孕結(jié)局關(guān)系,探討它們的關(guān)系及評價其對卵子成熟,胚胎發(fā)育及著床的應(yīng)用價值。
　　 研究對象與方法:
　　 1研究對象
　　 選取自2010年8月至2010年11月在鄭州大學(xué)第一屬醫(yī)院生殖中心行常規(guī)體外受精.胚胎移植的不孕患者60名。按獲卵數(shù)分低反應(yīng)組20人(獲卵數(shù)≤5枚)、中反應(yīng)組20人(5<獲卵數(shù)≤15)、高反應(yīng)組20人(獲卵數(shù)>15枚)。

4、　　 2.研究方法
　　 2.1患者血清及卵泡液M-CSF及IL-1β水平與妊娠結(jié)局的關(guān)系
　　 收集以下日期晨7:00空腹靜脈血4ml:基礎(chǔ)日(月經(jīng)第2-4天),降調(diào)節(jié)后14天,注射促性腺激素針HCG日,取卵日(OPU日)、取卵后48小時(OPU48小時)及第一管清亮卵泡液,采用酶聯(lián)免疫法檢測檢測M-CSF、IL-1β水平,采用電化學(xué)發(fā)光法檢測其E2、LH及P激素水平。
　　 2.2 M-CSF及IL-1β在

5、人卵顆粒細胞中的表達
　　 提取這60名患者(低、中、高反應(yīng)組各20名)取卵日卵泡液中的顆粒細胞,行RT-PCR檢測顆粒細胞上M-CSF級IL-1βmRNA的表達,然后采用免疫組織化學(xué)方法測量M-CSF及IL-1β蛋白的表達。
　　 3.結(jié)果:
　　 1.HCG日及取卵日妊娠組血清M-CSF,IL—1β水平(117.69±33.68 ng／l,107.84±36.86 ng／l;279.46±148.60 pg／

6、ml,170.28±99.98 pg／ml)較非妊娠組高(79.40±38.37 ng／l,74.40±38.32 ng／l；178.30±82.29 pg／ml,126.30±110.91 pg／ml)(P<0.05),OPU48小時妊娠組血清IL-1β水平(63.34±33.04 pg／ml)較非妊娠組低(129.08±119.53 pg／ml)(P<0.05)。
　　 2.OPU日卵泡液中M-CSF水平(956.33±25

7、7.83 ng／l；704.84±339.07 ng／l)較血清中高(107.84±36.86 ng／l；74.40±38.32)(P<0.05)。
　　 3.HCG日、取卵日血清及卵泡液中IL-1β及M-CSF、E2、獲卵數(shù)成正相關(guān)(r>0.67)。
　　 4.在促排卵過程中,從基礎(chǔ)狀態(tài)到HCG日,血清M-CSF、IL-1β、E2呈現(xiàn)由低逐漸升高的相似的趨勢。
　　 5.HCG日血清M-CSF及IL-1β水平年

8、齡<30歲組(121.41±23.37 ng／l；277.15±65.77 pg／ml)較年齡≥30歲組高(82.35±20.34 ng／l；177.99±61.62 pg／ml)(P<0.05)；M-CSF及IL-1β在Gn用量≤2250IU組(112.84±35.54 ng／l；263.40±132.65 pg／ml)高于Gn用量≥2250IU組(76.02±33.12 ng／l;178.72±84.47pg／ml)(P<0.01)

9、。
　　 6.低反應(yīng)組、中反應(yīng)組、高反應(yīng)組HCG日血清M-CSF及IL-1β水平呈逐漸增高趨勢(49.95±15.62 ng／ml,98.57±23.85 ng／ml,137.14±18.47 ng／ml;122.39±46.80 pg／ml,220.32±89.54 pg／ml,325.30±136.43 pg／ml),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 7.低反應(yīng)組,中反應(yīng)組,高反應(yīng)組顆粒細胞的M-CSF及IL

10、-1β的mRNA及蛋白表達呈逐步增高趨勢(0.134±0.027,0.502±0.113,0.833±0.185;0.153±0.046,0.338±0.072,0.619±0.136),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.015)。
　　 4.結(jié)論:
　　 1.HCG日及取卵日血清中M-CSF及IL-1β可促進胚胎著床,增加妊娠率；取卵后48小時較高水平IL-1β可抑制胚胎著床,降低妊娠率；
　　 2.血清M-CSF及I