基于脂質(zhì)體技術(shù)的蛋白質(zhì)類藥物傳遞系統(tǒng)的研究.pdf

1、脂質(zhì)體在生物體內(nèi)可以降解、無毒和無免疫原性，作為藥物載體，具有靶向性，從而減少藥物劑量，降低毒性，減少副作用等優(yōu)點(diǎn)。與傳統(tǒng)的脂質(zhì)體相比，復(fù)乳法制備的多泡脂質(zhì)體(MVLs)，還具有不連續(xù)的藥物溶液囊泡，這些囊泡被連續(xù)的非同心的類脂雙分子磷脂膜所分隔，具有更多的包封容積和較大的粒徑，當(dāng)某個(gè)囊泡破裂時(shí)，藥物只從破裂囊泡釋出，完整的囊泡仍然可以保持原狀，因而有很好的緩釋效應(yīng)。但它也同其它傳統(tǒng)脂質(zhì)體一樣，穩(wěn)定性差和易被清除；脂質(zhì)體是被動(dòng)地捕獲藥物

2、，所以對(duì)于水溶性的蛋白質(zhì)來說，低包封率也是一個(gè)很難解決的問題；MVLs純化后將導(dǎo)致大量的未包封蛋白質(zhì)藥物流失，而且分離MVLs本身也是一個(gè)比較復(fù)雜的過程。 以海藻酸鈉(Alg)包覆MVLs和未被MVLs包封的游離蛋白，形成一種新型蛋白質(zhì)類藥物載體系統(tǒng)(MVLs-Alg)，因其良好的材料特性及制備過程溫和的反應(yīng)特性可能成為極具有潛力的蛋白質(zhì)類藥物的載體系統(tǒng)。作為極具潛力的蛋白質(zhì)類藥物載體系統(tǒng)，是否具備高包封率、均一的粒徑、良好的釋

3、放性能以及蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和生物活性穩(wěn)定等缺乏認(rèn)識(shí)；MVLs和海藻鈉之間是否存在相互作用，以及MVLs-Alg的理化性質(zhì)和穩(wěn)定性也尚未研究。針對(duì)上述問題，本論文結(jié)合脂質(zhì)體和微囊化技術(shù)，建立一種新型蛋白質(zhì)類藥物載體系統(tǒng)，對(duì)MVLs-Alg的制備過程參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，并力圖認(rèn)識(shí)該載體系統(tǒng)的理化性質(zhì)、穩(wěn)定性和釋放性能，進(jìn)一步研究該載體系統(tǒng)對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和生物活性的影響。 首先，以牛血清蛋白(BSA)為模型藥物，采用復(fù)乳法制備MVLs，然后進(jìn)一

4、步利用Alg，采取乳化/內(nèi)部凝膠化法包封MVLs和游離的BSA，成功制備出高包封率，球型度好，尺寸小且分布均勻的MVLs-Alg，考察了過程參數(shù)(如藥材比、磷脂比、Alg濃度、攪拌速度等因素)對(duì)包封率、粒徑大小、產(chǎn)量和球型度等的影響，從而可以優(yōu)化制備工藝條件。 其次，考察了優(yōu)化后制備的MVLs-Alg粒徑大小、粒徑分布和過氧化值，研究MVLs-Alg在不同保存條件下的穩(wěn)定性和內(nèi)部結(jié)構(gòu)變化，該載體系統(tǒng)的表面形態(tài)圓整，光滑，隱約可見

5、MVLs均勻分散于凝膠珠中，平均粒徑為0.25 mm，提高了MVLs的包封率和穩(wěn)定性，而且在4 ℃條件下存放相對(duì)比較穩(wěn)定，經(jīng)差示熱分析，認(rèn)為MVLs與Alg之間可能發(fā)生了物理吸附作用。 再次，考察了該載體系統(tǒng)的體外釋放行為，對(duì)釋放情況進(jìn)行擬合，并考察不同工藝條件、不同釋放介質(zhì)和不同制備方法對(duì)體外溶出度的影響，發(fā)現(xiàn)該載體在SBF等滲液中具有明顯的緩釋效果，與單一的MLVs或Alg微囊相比，體外釋放速率明顯要慢，釋放過程與Weibu

6、ll方程的擬合優(yōu)度較高，釋放速率受Alg終濃度、TO的含量和制備方法的影響，而且和釋放介質(zhì)的pH值和離子濃度有關(guān)。 最后，以重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)為蛋白質(zhì)類模型藥物，借助分子篩高效液相色譜、圓二色譜及熒光色譜等技術(shù)，考察從該載體系統(tǒng)中釋放出來的蛋白質(zhì)類藥物的完整性、二級(jí)結(jié)構(gòu)和分子構(gòu)象的變化，以及監(jiān)測(cè)對(duì)小鼠骨髓來源的CFU-GM集落數(shù)的刺激生長情況，考察對(duì)蛋白質(zhì)類藥物的生物活性的變化。結(jié)果表明，從MVLs-Al