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文檔簡介
1、竇房結(SAN)急、慢性缺血可致其器質性病變、沖動形成和傳導障礙,是心臟電生理活動異常的主要因素之一,亦是發(fā)病率較高的病竇綜合征常見病因。由于竇房結體積小,功能單位少,細胞連接簡單,血供豐富且多為單支血管供血,故極易受供血側冠狀動脈病變的影響。一旦結實質病變后,易致其機能障礙,恢復較困難。目前,有關普通心肌缺血-再灌注的研究十分廣泛。一些高效、高選擇性且不易產(chǎn)生耐藥性的一氧化氮載體類藥物已在臨床上用于防治多種心血管疾病。而對心臟傳導系統(tǒng)
2、缺血-再灌注損傷與保護的認識遠遠不夠。因此,研究竇房結缺血-再灌注結構和功能的變化及發(fā)生機理,并探討內、外源性因素對缺血-再灌注竇房結細胞的保護、修復機制具有重要的基礎理論和臨床應用意義。 本文在竇房結在體器官水平和分離培養(yǎng)單細胞水平上,僅從組織形態(tài)學和電生理功能角度設計如下幾個方面的研究內容: 第一部分在體兔竇房結缺血再灌注損傷及L-精氨酸的干預 第一章兔在體竇房結缺血再灌注損傷動物模型建立 目的:以手
3、術方式建立可靠的在體竇房結缺血再灌注動物模型。 結論:此模型建立的關鍵是從胸骨正中開胸、右冠狀動脈根部結扎,結合心電圖加以確認,方法可靠,成功率高。 第二章兔右冠狀動脈缺血再灌注致心律失常的演變及L-精氨酸干預作用 目的:觀察右冠狀動脈缺血再灌注致心律失常的演變及L-Arg干預效果。 結論:補充適量的L-Arg具有抗心律失常作用;缺血期時間越長,L-Arg抗再灌注心律失常作用越差。 第三章L-精氨
4、酸對兔右冠狀動脈缺血再灌注時竇房結功能的影響 目的:觀察L-精氨酸對兔右冠狀動脈缺血再灌注竇房結傳導時間(SACT)和恢復時間(SNRT)的影響。 結論:隨著缺血時間延長SAN功能損傷加重;早期再灌注損傷敏感;組織內適當補充L-Arg,于缺血期和再灌早期對SAN電生理功能恢復是有益的,于再灌注后期可能加重損傷。 第四章缺血再灌注竇房結細胞凋亡及相關基因bcl-2、bax和iNOS蛋白表達及L-精氨酸干預
5、目的:探討缺血再灌注竇房結細胞凋亡與其相關基因bcl-2、bax以及iNOS蛋白表達之間的關系,并評價L-Arg干預作用。 結論:①iNOS生成增多可能與缺血再灌注竇房結細胞凋亡密切相關;②補充適量L-Arg能減少細胞凋亡,可能與bcl-2表達上調和bax表達下調有關。 第五章缺血再灌注竇房結間質膠原網(wǎng)絡的改建 目的:觀察缺血-再灌注竇房結膠原網(wǎng)架重構與改建的形態(tài)學改變。 結論:竇房結缺血再灌注致其間質膠
6、原網(wǎng)絡重構,必然影響到其沖動的產(chǎn)生和傳遞,可能是病竇綜合征發(fā)病原因之一。 第二部分離體兔竇房結模擬缺血再灌注損傷及L-精氨酸的干預 第一章乳兔竇房結定位和細胞構筑的光鏡觀察 目的:詳細觀察乳兔竇房結的位置、形態(tài)大小和細胞構筑,為行竇房結的準確取材提供充分的形態(tài)學資料。 結論:①位置特殊,取材時應留足上腔靜脈近端;②細胞構筑簡單,起搏細胞含量高,細胞較幼稚,較適合竇房結細胞原代純化培養(yǎng)。 第二章乳兔
7、竇房結取材和純化培養(yǎng) 目的:為深入研究竇房結細胞的結構特點和自律起搏的機制等提供獲取充足的竇房結單細胞的實驗方法。 結論:細胞體積小,含量高,搏動快的梭形細胞是起搏細胞。 第三章模擬缺血再灌注對乳兔竇房結培養(yǎng)細胞結構損傷及L-精氨酸的干預效果 目的:觀察模擬缺血再灌注培養(yǎng)乳兔竇房結細胞損傷及L-精氨酸干預影響。 結論:①模擬缺血一定時間后可以誘導竇房結細胞凋亡,再灌注后細胞凋亡加重,甚至導致細胞壞
8、死;②模擬缺血/再灌注竇房結細胞與L-精氨酸共同孵育,可減輕細胞損傷。 第四章L-精氨酸對模擬缺血再灌注培養(yǎng)乳兔竇房結細胞損傷的保護機制 目的:檢測缺血/再灌注后SAN細胞內SOD活性、MDA、NOS、NO含量變化,探討L-Arg對竇房結細胞保護的可能機制。 結論:①再灌注后細胞損傷較單純缺血重,可能與活性氧自由基生成較多有關;②補充NO合成底物L-精氨酸具有清除自由基功效,增加SOD活力,減少氧自由基生成、阻斷
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