L-精氨酸發(fā)酵條件研究.pdf

1、本論文以基因工程菌Escherichia coli LGE35(Thr-,Met-,Kan+)為研究對象,研究了菌株E.coli LGE35發(fā)酵生產(chǎn)L-精氨酸的最佳種子培養(yǎng)基、最佳搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基、5L發(fā)酵罐分批發(fā)酵過程及其動力學分析,結果如下： 1.對實驗菌株E. coli LGE35(Thr-,Met-,Kan+)所帶的遺傳標記進行了驗證,結果顯示其遺傳標記都在,遺傳穩(wěn)定性良好。通過單因素實驗和正交實驗,確定了E.coli L

2、GE35生長的最佳種子培養(yǎng)基為：蔗糖20g/L,牛肉膏50g/L,蛋白胨20g/L,L-蛋氨酸0.05g/L,L-蘇氨酸0.05g/L,卡那霉素0.1g/L,碳酸鈣20g/L。 2.在對發(fā)酵培養(yǎng)基單次單因素影響實驗的基礎上,應用Plackett-Burman設計實驗,確定了蔗糖、硫酸銨和酵母粉為影響菌株E.coli LGE35搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)L-精氨酸的主要因素。通過響應曲面分析法對這三個主要因素的最佳水平及其交互作用進行了研究,建

3、立了二次回歸方程并最終確定了發(fā)酵培養(yǎng)基為：蔗糖71g/L,硫酸銨31g/L,酵母粉14g/L,硫酸鎂1g/L,磷酸氫二鉀3g/L,L-蛋氨酸0.15g/L,L-蘇氨酸0.1g/L,卡那霉素0.05g/L,FeSO4 0.01g/L,MnSO4 0.01g/L,VB1 0.01g/L。最佳搖瓶分批發(fā)酵培養(yǎng)條件為：溫度30℃,培養(yǎng)基初始pH7.0,500ml凹底三角瓶中裝液量20ml,接種量8％,搖床轉速240r/min。在優(yōu)化條件下,菌株