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1、L-鳥氨酸是精氨酸合成中間體,對(duì)肝病治療與心臟強(qiáng)健亦非常有效,其市場(chǎng)前景越來(lái)越廣闊。本文以代謝控制發(fā)酵理論為指導(dǎo),重點(diǎn)對(duì)L-鳥氨酸高產(chǎn)菌1006進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)條件、發(fā)酵條件的優(yōu)化,并對(duì)其發(fā)酵動(dòng)力學(xué)分別進(jìn)行研究。主要研究?jī)?nèi)容結(jié)果如下: (1) 利用HPLC-ELSD法測(cè)定發(fā)酵液中L-鳥氨酸。色譜條件為Prevail C18柱, 0.06% HFBA溶液-乙腈 (88∶12)為流動(dòng)相,柱溫30℃,流速為0.8 Ml/min,ELSD漂
2、移管溫度110℃,氣體流量2.8 L/min。L-鳥氨酸在0.1-0.6mg/Ml范圍內(nèi),線性回歸比非常顯著( R2= 0.9998),平均回收率達(dá)到98.94 %。該法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好,適合于L-鳥氨酸的定量分析。 (2)研究菌株1006的搖瓶分批發(fā)酵條件。應(yīng)用Box-Behnken designs 和響應(yīng)面法分別優(yōu)化出種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基的配比,優(yōu)化后發(fā)酵培養(yǎng)基為(g/L):葡萄糖80.50,酵母膏20.5
3、0,(NH4)2SO4 53,MgSO4·7H2O 3.70, K2HPO4·3H2O 1.50, CaCO310,F(xiàn)eSO4·7H2O 18.30mg/ L,MnSO4·H2O22.38mg/L,Biotin0.05 mg/ L,VB10.1mg/ L。并對(duì)種子培養(yǎng)條件和發(fā)酵條件進(jìn)行了研究,優(yōu)化后搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)條件為:發(fā)酵培養(yǎng)基初始Ph 7.2;裝液量30 Ml/500mL三角瓶;搖瓶轉(zhuǎn)速為200r/min;發(fā)酵溫度為30℃。在優(yōu)化條件
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