川芎嗪對環(huán)孢素A藥動學的影響及其機制探討.pdf

1、一、目的 研究中藥成分川芎嗪對大鼠灌服環(huán)孢素A的藥動學影響，以及利用在體腸灌流法對其機制進行探討。 二、方法 1.給藥及采樣方法 1.1大鼠體內(nèi)實驗 40只雄性SD大鼠按體重進行隨機區(qū)組設計，等分為4組。試驗第1d，每只大鼠灌服環(huán)孢素A(10 mg／kg)后，于0，1，2，3，4，6，8，12，24，36和48 h從尾靜脈處采血0.2～0.25 mL。然后4組大鼠從試驗的第4 d到第8 d進行不同

2、的預處理，即每日分別灌服蒸餾水(0.5 mL，bid，I組)，維拉帕米(10 mg／kg，qd，II組)，低劑量川芎嗪(10 mg／kg，bid，III組)和高劑量川芎嗪(30 mg／kg，bid，Ⅳ組)。第9 d各組大鼠合用環(huán)孢素A(10 mg／kg)和上述的不同物質(zhì)，按第1 d的時間點采樣。 1.2大鼠在體腸吸收實驗 24只雄性SD大鼠按體重進行隨機區(qū)組設計，等分為4組，進行以下不同方式的處理：A組：循環(huán)灌流液中單加

3、入羅丹明-123；B組：循環(huán)灌流液中加入川芎嗪與羅丹明-123；C組：大鼠灌服川芎嗪4 d后，在腸灌流實驗的循環(huán)液中加入川芎嗪和羅丹明-123；D組：大鼠灌服川芎嗪4 d后，在腸灌流實驗的循環(huán)液中單加羅丹明．123。大鼠實驗前禁食12 h，腹腔注射戊巴比妥(40 mg／mL，0.1 mL／100 g)麻醉，用37℃的生理鹽水將腸內(nèi)容物沖洗干凈，自十二指腸上部及回腸下部各插入直徑為0.15 cm的玻璃管，與膠管相連通過蠕動泵，用空白循環(huán)液

4、平衡20 min后，各組換用含羅丹明-123的循環(huán)灌流液或含羅丹明-123和川芎嗪的循環(huán)灌流液。此后每隔20 min取樣1mL，同時補加空白循環(huán)液1 mL。 2.生物樣本的測定方法 2.1用HPLC法測定全血中環(huán)孢素A的濃度。 2.2用HPLC法同時測定循環(huán)灌流液中羅丹明-123和酚紅的濃度。 三、結(jié)果 1．生物樣本測定的方法 環(huán)孢素A血藥濃度測定 環(huán)孢素A在0.04～2.8μg／mL

5、濃度范圍內(nèi)線性良好，r=0.999 2，最低定量限為0.04μg/mL(S／N≥10)。方法回收率為94.2％～98.1％，日間和日內(nèi)的RSD均小于15％。 在體腸灌流液的測定羅丹明-123和酚紅的色譜峰分離良好，且不受循環(huán)液中其它雜質(zhì)的干擾，其線形范圍分別為：0.125～1.50 μg/mL和5～50 mg／mL，日內(nèi)、日間RSD均小于15％。 2．大鼠前、后灌服CsA的主要藥動學參數(shù) 第1組：大鼠前、后兩次灌

6、服CsA的藥動學參數(shù)分別為：AUC<,o-48>(12.6±6.0μg·h／mL和12.3±4.2μg·h／mL)，AUC<,0-∞>(13.4±6.1μg·h／mL和12.9±4.2μg·h／mL)，C<,max>(0.9±0.3μg／mL和1.0±0.3μg／mL)，t<,l／2>(10.3±1.7 h和9.8±1.4h)，T<,max>(4.14±1.4 h和3.8±0.4 h)，V(8.54±3.2L和8.1±1.5L)，cL(

7、0.60±0.18L／h和0.59±0.15 L／h)。 第1I組：大鼠前、后兩次灌服CsA的藥動學參數(shù)分別為：AUC<,0-48>(11.0±4.7μg·h／mL和21.34±5.0μg·h／mL)，AUC<,0-∞>(11.9±4.7μg·h／mL和22.9±5.0μg·h／mL)，C<,max>(0.8±0.3μg／mL和1.3±0.3μg／mL)，t<,l／2>(10.8±I.1 h和12.2±I.2h)，T<,max>

8、(3.9±I.3hT 4.8±1.0 h)，V(10.7±2.3L和6.2±I.9 L)，CL(0.70±0.19 L／h和0.37±0.15 L／h)。 第III組：大鼠前、后兩次灌服CsA的藥動學參數(shù)分別為：AUC<,0-48>(11.8±3.4μg·h／mL和14.8±2.9 μg·h／mL)，AUC<,1-∞>(12.7±3.4μg·h／mL和15.9±3.0 μg·h／mL)，C<,max>(O.9±0.3μg/mL和

9、1.1±0.2μg／mL)，t<,1／2>(11.6±1.0h和11.1±1.5h)，T<,max>(4.0±I.0h和4.6±1.0 h)，V(8.0±3.4L和6.7±1.8L)，cL(0.50±0.25 L／h和0.43±0.13 L／h)。 第Ⅳ組：大鼠前、后兩次灌服CsA的藥動學參數(shù)分別為：AUC<,0-48>(12.9±3.0μg·h／mL和21.4±4.6 μg·h／mL)，AUC<,0-∞>(13.7±2.8μg

10、·h／mL和22.44±4.4 μg·h／mL)，C<,max>(1.0±0.4μg／mL和1.5±0.5μg/mL)，t<,l／2>(11.5±2.3 h和10.5±2.2 h)，T<,max>(3.6±1.3h和4.1±1.4h)，V(7.2±2.8L和4.0±I.1 L)，CL(0.47±0.27L／h和0.34±0.12 L／h)。 3．預處理及合用各種物質(zhì)對灌服CsA的藥動學影響 合用蒸餾水組(第1組)的CsA

11、藥動學參數(shù)前后無顯著性差異；維拉帕米預處理并合用后(第II組)，AUC<,0-48>、AUC<,0-48>和C<,max>均顯著增加(p<0.01)，t<,l／2>顯著延長(p<0.01)，CL和V顯著降低(p<0.01)，而T<,max>的變化無統(tǒng)計學差異。低劑量川芎嗪預處理并與CsA合用后(第Ⅲ組)，AUC<,0-48>和Cm戕有增加的趨勢，但無統(tǒng)計學的差異，其余藥動學參數(shù)的變化也無統(tǒng)計學的差異。高劑量川芎嗪預處理并與CsA合用后(

12、第Ⅳ組)，ALJC<,0-48>、AUC<,0-∞>和C<,max>均有顯著的增加(p<0.01)，V顯著降低(p<0.05)，而其他藥動學參數(shù)的變化無統(tǒng)計學差異。 4．大鼠在體腸試驗中羅丹明-123的吸收參數(shù) A組羅丹明-123的小腸吸收速率常數(shù)和吸收百分率為(0.2690±0.0480)h<'-1>和(11.77±3.48)％； B組羅丹明-123的小腸吸收速率常數(shù)和吸收百分率為(0.3076±0.0599)h<

13、'-1>和(13.48±2.97)％； C組羅丹明-123的小腸吸收速率常數(shù)和吸收百分率為(0.3399±0.0424)h<'-1>和(15.73±2.49)％； D組羅丹明-123的小腸吸收速率常數(shù)和吸收百分率為(0.2957±0.0523)h<'-1>和(13.62±2.50)％。 5．合用川芎嗪對羅丹明-123吸收的影響 對羅丹明-123的吸收速率常數(shù)和吸收百分率進行方差分析，結(jié)果A組和C組的吸收速率常數(shù)

14、和吸收百分率有顯著性差異(P<0.05)，而兩個參數(shù)在其它各組之間均無顯著性差異(p>0.05)。 四、結(jié)論 1．高劑量的川芎嗪灌服于大鼠一定時間后，高劑量的川芎嗪與CsA合用能提高CsA的灌服吸收程度，但對CsA的體內(nèi)消除過程無顯著影響。 2．大鼠灌服川芎嗪一段時間后，在腸灌流的循環(huán)液中加入川芎嗪能促進P-gp的底物(羅丹明-123)在腸道內(nèi)的吸收。 3．川芎嗪提高CsA的口服生物利用度的主要機制可能是