尾加壓素-II和轉(zhuǎn)化生長因子-β1在哮喘氣道重塑中的作用及調(diào)控.pdf

1、目的：
　　 1.研究尾加壓素-Ⅱ(U-Ⅱ)和轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)在支氣管哮喘(簡稱哮喘)氣道重塑中的作用。
　　 2.探討U-Ⅱ與TGF-β1在哮喘氣道重塑發(fā)生發(fā)展中的相關(guān)性。
　　 3.觀察布地奈德(BUD)、姜黃素(Cur)對哮喘氣道重塑及U-Ⅱ、TGF-β1表達的調(diào)控作用。
　　 方法：
　　 SPF級雄性SD大鼠96只,4～6周,100～120克,用卵白蛋白(OVA)致敏與

2、激發(fā),建立哮喘大鼠氣道重塑模型。96只大鼠隨機分為正常對照組(N組)、哮喘組(A組)、布地奈德組(B組)和姜黃素組(C組),每組24只,各組分別在第2周、第4周組和第8周處死大鼠各8只。各組大鼠分別在激發(fā)后1～2h處死,留取標(biāo)本備測。圖像分析技術(shù)測定肺內(nèi)支氣管壁厚度(Wat)和支氣管平滑肌厚度(Wam)；酶聯(lián)免疫吸附實驗法(ELISA)測定血清和支氣管肺泡灌洗液(BALF)中U-Ⅱ和TGF-β1的含量；免疫組化(IHC)檢測肺組織U-Ⅱ

3、和TGF-β1表達；逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法測定肺組織勻漿中U-ⅡmRNA和TGF-β1mRNA的表達。
　　 結(jié)果：
　　 1.光鏡
　　 正常對照組支氣管和血管周圍未見炎性細胞浸潤,支氣管平滑肌未出現(xiàn)增厚。哮喘組可見支氣管和血管周圍炎性細胞浸潤,以淋巴細胞、嗜酸性粒細胞、中性粒細胞為主；A4、A8組可見管腔內(nèi)粘液栓,基底膜增厚,支氣管壁增厚、膠原沉秋等。各干預(yù)組炎性細胞明顯減少,其它病理改變較哮喘

4、組減輕。
　　 2.支氣管壁厚度和支氣管平滑肌厚度2.1支氣管壁厚度的比較(μm2/μm)
　　 A2組(48.94±1.51)、A4組(53.56±2.44)、A8組(64.00±2.57)與N2組(29.51±1.71)、N4組(30.46±1.04)、N8組(32.17±1.24)比較存在顯著性差異(P<0.01)；A4組、A8組與A2組比較存在顯著性差異(P<0.01),A8組與A4組比較呈顯著性差異(P<0.0

5、1)；B2組(39.05+0.71)、C2組(41.24±0.81)與A2組比較存在顯著性差異(P<0.01),B2組、C2組與N2組的比較呈顯著性差異(P<0.01),B2組和C2組之間比較無顯著性差異(P>0.05)；B4組(42.91±1.34)、C4組(46.10±1.18)與A4組比較存在顯著性差異(P<0.01),B4組、C4組與K4組比較存在著性差異(P<0.01),B4組與C4組之間比較無顯著性差異(P>0.05)；B8

6、組(49.91±1.21)、C8組(52.47±1.29)與A8組比較存在顯著性差異(P<0.01),B8組、C8組與N8組比較存在顯著性差異(P<0.01),B8組與C8組比較無顯著性差異(P>0.05)。
　　 2.2支氣管平滑肌厚度的比較(μm2/μm)
　　 A2組(18.61±1.41)、A4組(22.01±1.63)、A8組(27.97±2.13)與N2組(12.68±1.93)、N4組(13.02±0.76

7、)、N8組(13.11±1.27)比較存在顯著性差異(P<0.01)；A4組、A8組與A2組比較存在顯著性差異(P<0.01),A8組與A4組比較呈顯著性差異(P<0.01)；B2組(15.11±0.82)、C2組(15.94±0.75)與A2組比較存在顯著性差異(P<0.01),B2組、C2組與N2組的比較呈顯著性差異(P<0.01),B2組和C2組之間比較無顯著性差異(P>0.05)；B4組(15.82±0.63)、C4組(16.7

8、9±0.68)與A4組比較均存在顯著性差異(P<0.01),B4組、C4組與N4組的比較存在顯著性差異(P<0.01),B4組與C4組比較無顯著性差異(P>0.05)；B8組(20.06±1.33)、C8組(22.41±0.93)與A8組比較存在顯著性差異(P<0.01),B8組、C8組與N8組比較存在顯著性差異(P<0.01),B8組和C8組之間比較無顯著性差異(P>0.05)。
　　 3.血清和BALF中U-Ⅱ和TGF-β1

9、含量
　　 3.1血清中U-Ⅱ濃度比較(ng/ml)
　　 A2組(48.22±4.40)、A4組(73.61±8.09)、A8組(102.21±12.96)與N2組(7.76±1.06)、N4組(8.2±0.56)、N8組(8.55±0.95)比較存在顯著性差異(P<0.01)；A4組、A8組與A2組比較存在顯著性差異(P<0.01),A8組與A4組比較呈顯著性差異(P<0.01):B2組(26.04±2.31)、C2

10、組(32.92±2.14)與A2組比較存在顯著性差異(P<0.01),B2組、C2組與N2組的比較呈顯著性差異(P<0.01),B2組和C2組之間比較無顯著性差異(P>0.05)；B4組(28.45±1.41)、C4組(33.82±3.55)與A4組比較存在顯著性差異(P<0.01),B4組、C4組與N4組的比較存在顯著性差異(P<0.01),B4組與C4組比較無顯著性差異(P>0.05)；B8組(54.85±2.36)、C8組(61.

11、17±3.11)與A8組比較存在顯著性差異(P<0.01),B8組、C8組與N8組比較存在顯著性差異(P<0.01),B8組和C8組之間比較無顯著性差異(P>0.05)。
　　 3.2 BALF中U-Ⅱ濃度比較(ng/ml)
　　 A2組(56.06±2.82)、A4組(78.51±3.61)、A8組(102.21±12.96)與N2組(2.74±0.17)、N4組(2.88±0.37)、N8組(3.01±0.32)比較

12、存在顯著性差異(P<0.01);A4組、A8組與A2組比較均存在顯著性差異(P<0.01),A8組與A4組比較呈顯著性差異(P<0.01)；B2組(24.52±0.61)、C2組(30.17±2.52)與A2組比較均存在顯著性差異(P<0.01),B2組、C2組與N2組比較呈顯著性差異(P<0.01),B2組和C2組之間比較無顯著性差異(P>0.05)；B4組(36.11±1.73)、C4組(44.17±1.44)與A4組比較均存在顯著

13、性差異(P<0.01),134組、C4組與N4組比較存在顯著性差異(P<0.01),B4組與C4組比較無顯著性差異(P>0.05)；B8組(55.30±2.86)、C8組(55.34±1.29)與A8組比較存在顯著性差異(P<0.01),B8組、C8組與N8組比較存在顯著性差異(P<0.01),B8組與C8組之間比較無顯著性差異(P>0.05)。
　　 3.3血清中TGF-β1濃度比較(pg/ml)
　　 A2組(157

14、8.7±74.98)、A4組(2322.4±94.43)、A8組(2643.7±74.5)與N2組(393.4±41.78)、N4組(408.17±35.33)、N8組(407.25±42.06)比較存在顯著性差異(P<0.01)；A4組、A8組與A2組比較存在顯著性差異(P<0.01),A8組與A4組比較呈顯著性差異(P<0.01)；B2組(729.8±43.52)、C2組(907.4±39.12)與A2組比較均存在顯著性差異(P<0

15、.01),B2組、C2組與N2組的比較也具有顯著性差異(P<0.01),B2組和C2組之間比較無顯著性差異(P>0.05)；B4組(1168.1±73.81)、C4組(1222.1±72.95)與A4組比較均存在顯著性差異(P<0.01),B4組、C4組與N4組的比較存在顯著性差異(P<0.01),B4組與C4組比較無顯著性差異(P>0.05)；B8組(1265.3±60.59)、C8組(1534.2±59.71)與A8組比較存在顯著性

16、差異(P<0.01),B8組、C8組與N8組比較存在顯著性差異(P<0.01),B8組與C8組之間比較無顯著性差異(P>0.05)。
　　 3.4 BALF中TGF-β1濃度比較(pg/ml)
　　 4.IHC檢測肺組織中U-Ⅱ、TGF-β1蛋白表達
　　 5.RT-PCR法測肺組織勻漿中U-ⅡmRNA、TGF-β1 mRNA表達
　　 6.相關(guān)分析
　　 結(jié)論：
　　 1.U-Ⅱ和TGF