聯(lián)用鈉氫交換抑制劑與抗氧化劑預(yù)防大鼠肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討鈉氫交換抑制劑阿米洛利分別與抗氧化劑姜黃素、丹參酮Ⅱ A、維生素E聯(lián)用對大鼠實(shí)驗(yàn)性肝纖維化的預(yù)防作用,和對活化肝星狀細(xì)胞的影響.方法:在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,建立二甲基亞硝胺(DMN)大鼠肝纖維化模型,以馬洛替酯(malotilate,Mal)為陽性對照,觀察阿米洛利(amiloride,Am)、姜黃素(curcumin,Cur)、丹參酮Ⅱ A(tanshinone Ⅱ A,Tsn)、維生素E(vitaminE,VitE)、阿米洛利+姜

2、黃素(Am+Cur)、阿米洛利+丹參酮ⅡA(Am+Tsn)和阿米洛利+維生素E(Am+VitE)預(yù)防后,肝重/體重和脾重/體重比值、血及肝組織生化、羥脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)、透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid,HA)及層粘連蛋白(Laminin,LN)含量變化;光鏡下觀察組織形態(tài)學(xué)變化.在體外實(shí)驗(yàn)中,以肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSC)為靶細(xì)胞,采用體外無包被的塑料培養(yǎng)皿建立肝

3、纖維化細(xì)胞模型,觀察Am、Cur、Tsn、Am+Cur和Am+Tsn對大鼠HSC增殖及細(xì)胞外基質(zhì)分泌的影響,以MTT比色法測定HSC的增殖;放射免疫法測定HA和LN;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定Ⅰ型膠原的水平.采用三醋酸亞硝酸鐵(FeNTA)建立HSC氧化應(yīng)激模型,以ELISA法測定細(xì)胞培養(yǎng)液中Ⅰ型膠原的水平.以試劑盒推薦方法分別測定細(xì)胞培養(yǎng)液中MDA、GSH、GSH-PX、SOD水平.結(jié)論:鈉氫交換抑制劑與抗氧化劑對DMN誘導(dǎo)的肝