幾種抗氧化劑體外抗氧化活性的比較研究.pdf

1、活性氧（Reactive oxygen species，ROS）是機(jī)體正常的代謝產(chǎn)物，但其活性具有兩面性。低含量的ROS 對(duì)機(jī)體具有一定積極的生理作用。但當(dāng)其產(chǎn)生和清除之間的平衡遭到破壞時(shí)，造成氧化脅迫，這與許多疾病都有密切關(guān)系。天然抗氧化劑作為機(jī)體抗氧化非酶系統(tǒng)的成分，可直接清除活性氧；還可抑制活性氧的產(chǎn)生；或通過(guò)作用于抗氧化反應(yīng)元件而提高內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)的水平或抑制氧化酶的表達(dá)而減少活性氧的產(chǎn)生。因此，抗氧化劑的介入，可能會(huì)有效防治

2、ROS相關(guān)疾病的發(fā)生和發(fā)展。
　　 本文對(duì)五種天然產(chǎn)物的抗氧化活性進(jìn)行了檢測(cè)；測(cè)定了兩種三萜化合物抑制細(xì)胞氧化損傷的活性，并對(duì)它們的作用進(jìn)行了深一步的探討。
　　 在對(duì)五種天然產(chǎn)物茜素紅(Aliarin red，AR)、白藜蘆醇(Resveratrol，Res）、阿魏酸(Ferulic acid，F(xiàn)A)、葛根素(Puerarin，Pue)和芹菜素(Apigenin，Api)進(jìn)行體外抗氧化活性的檢測(cè)中，采用甲基紫比色法、M

3、DA 法和SDS-PAGE，檢測(cè)了它們清除羥自由基的能力、對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化及蛋白質(zhì)氧化的保護(hù)作用。結(jié)果表明，五種化合物在不同的反應(yīng)體系中表現(xiàn)出不同的抗氧化活性。茜素紅清除HO·的能力及對(duì)蛋白質(zhì)氧化的保護(hù)作用最強(qiáng)，白藜蘆醇對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化的抑制作用最強(qiáng)。其中茜素紅具有較強(qiáng)的抗氧化活性，其有可能成為一種植物源性的抗氧化劑。
　　 齊墩果酸（Oleanolic acid，OA）和熊果酸(ursolic acid，UA)是廣泛存在于植物界有相似

4、化學(xué)結(jié)構(gòu)的三萜化合物，因其廣泛的生物學(xué)活性和低毒性備受治療學(xué)的青睞。本文采用過(guò)氧化氫對(duì)肝癌HepG2 細(xì)胞氧化損傷模型，在細(xì)胞水平對(duì)這兩個(gè)三萜化合物對(duì)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用進(jìn)行了比較研究。采用單細(xì)胞凝膠電泳法測(cè)定化合物對(duì)細(xì)胞DNA氧化損傷的保護(hù)作用；檢測(cè)了它們對(duì)細(xì)胞中脂質(zhì)過(guò)氧化及蛋白質(zhì)氧化損傷的保護(hù)作用；并檢測(cè)了對(duì)細(xì)胞中谷胱甘肽(GSH)含量、抗氧化酶SOD、CAT、Gpx活性的影響。
　　 結(jié)果表明OA和UA在5-20 μmo

5、l/L 均能明顯抑制Fe2+誘發(fā)的細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化作用，并呈濃度依賴性。在濃度為20μmol/L 時(shí)，OA和UA 對(duì)MDA 產(chǎn)生的抑制率分別達(dá)到38％和35％。這兩種化合物在濃度5-20 μmol/L 范圍均能降低蛋白質(zhì)羰基含量，抑制蛋白質(zhì)氧化損傷；減輕HepG2 細(xì)胞DNA所受氧化損傷。當(dāng)用300 μmol/L 濃度過(guò)氧化氫處理細(xì)胞時(shí)GSH含量下降到正常組的36.7％，用5、10和20 μmol/L的UA和OA 兩種三萜預(yù)先進(jìn)行處理時(shí)，

6、都可使GSH 濃度有一定回升，隨著濃度的增高保護(hù)作用也提高，并且OA 比UA的作用強(qiáng)。濃度為20 μmol/L時(shí)，OA和UA可使GSH的含量分別提高到氧化脅迫前的78％和74.6％。
　　 H2O2 誘導(dǎo)的氧化脅迫使HepG2 細(xì)胞的GPx、SOD、CAT 酶活性均有所下降，OA和UA處理后使酶活性升高，當(dāng)濃度為20μmol/L 時(shí)，和對(duì)照組相比OA和UA 使GPx 酶活性分別升高了16.1％和13.3％，使CAT 酶活性分別升