線粒體靶向小分子抗氧化劑的設(shè)計(jì)、合成及活性評價(jià).pdf

1、目的:設(shè)計(jì)并合成線粒體靶向小分子的抗氧化劑并通過藥理學(xué)評價(jià)篩選出輻射防護(hù)效果突出的化合物。
　　方法:本項(xiàng)目包括線粒體靶向抗氧化劑的合成和活性評價(jià)部分，在化合物的合成部分本項(xiàng)目從兩條路線出發(fā)，其一，選取迷迭香酸為天然抗氧化劑，通過線粒體靶向基團(tuán)的修飾，成為線粒體靶向抗氧化劑;其二，以乙酰乙酸乙酯和煙酰胺從頭合成具有線粒體靶向的二氫吡啶小分子抗氧化劑。在化合物活性評價(jià)部分，通過測定照射后細(xì)胞存活，線粒體靶向小分子抗氧化劑在細(xì)胞內(nèi)的分

2、布，單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)，染色體畸變和微核試驗(yàn)以及γ-H2AX指標(biāo)評價(jià)化合物的輻射防護(hù)效果。
　　結(jié)果:通過化學(xué)合成和相關(guān)儀器表征確定合成了5個(gè)未報(bào)道的全新的線粒體靶向抗氧化劑。藥理學(xué)結(jié)果表明，目標(biāo)化合物具有低毒，防護(hù)效果良好等的一系列優(yōu)勢。中性紅法測定細(xì)胞存活實(shí)驗(yàn)表明目標(biāo)化合物能夠顯著提高照射后細(xì)胞的存活率;活性氧測定結(jié)果表明目標(biāo)化合物能夠有效地清除輻照后細(xì)胞中的活性氧(ROS);染色體畸變和微核實(shí)驗(yàn)提示目標(biāo)化合物能夠有效地保護(hù)人

3、外周血淋巴細(xì)胞的遺傳物質(zhì)免受活性氧的損傷;單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)提示線粒體靶向修飾后的抗氧化劑能夠更有效的保護(hù)細(xì)胞核中的DNA不受輻射產(chǎn)生活性氧的影響;γ-H2AX免疫熒光實(shí)驗(yàn)提示，照射前給予線粒體靶向抗氧化劑能夠有效地阻止細(xì)胞核DNA雙鏈斷裂，與此同時(shí)，通過對目標(biāo)化合物的分布測定表明，目標(biāo)化合物能夠有效地聚集在線粒體中發(fā)揮其藥理學(xué)作用。
　　結(jié)論:通過比較迷迭香酸和線粒體靶向迷迭香酸輻射防護(hù)效果，可以發(fā)現(xiàn)線粒體靶向迷迭香酸從ROS清

4、除效果和輻射防護(hù)結(jié)果方面都優(yōu)于修飾前的迷迭香酸，表明線粒體靶向抗氧化劑具有重要的研究價(jià)值，此外，通過研究體內(nèi)抗氧化性物質(zhì)NAD(P)H的母核結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)并合成了Mito-DH1、Mito-DH2、Mito-DH3和Mito-N四個(gè)化合物并通過核磁共振和質(zhì)譜確定相關(guān)結(jié)構(gòu)，通過體外輻射防護(hù)研究，表明設(shè)計(jì)的化合物對細(xì)胞的毒性不僅在可接受范圍，而且具有優(yōu)異的輻射防護(hù)效果，各種試驗(yàn)指標(biāo)表明這一系列化合物能通過清除輻照產(chǎn)生的ROS而夠有效地保護(hù)CHO-