毛裂蜂斗菜的生藥學(xué)研究.pdf

1、毛裂蜂斗菜(Petasites tricholobus Franch.)是菊科蜂斗菜屬植物,廣泛分布于我國(guó)西南、西北地區(qū)。其根莖民間用于治療腦卒中,麻痹,高血壓,咳嗽,骨折蛇傷等。 本論文在課題組前期從毛裂蜂斗菜根莖中分離得到4個(gè)倍半萜類新化合物[蜂斗菜內(nèi)酯Ⅰa(1),蜂斗菜內(nèi)酯Ⅱa(2),蜂斗菜內(nèi)酯Ⅲa(3),蜂斗菜內(nèi)酯Ⅳa(4)]的基礎(chǔ)上,作為延續(xù)性工作,繼續(xù)對(duì)毛裂蜂斗菜根莖的化學(xué)成分進(jìn)行了研究。從乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部

2、分,分離得到1個(gè)倍半萜內(nèi)酯類新化合物,應(yīng)用理化常數(shù)測(cè)定和光譜學(xué)方法(mp、IR、1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HMQC、COSY、NOSEY、EI-MS、ESI-MS)鑒定了該化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu),命名為蜂斗菜內(nèi)酯Ⅴa(5)。 在此基礎(chǔ)上,結(jié)合體外大鼠神經(jīng)元缺氧-復(fù)氧藥理模型及各種氧化性損傷模型,考察了蜂斗菜內(nèi)酯Ⅰa-Ⅴa對(duì)缺氧-復(fù)氧造成的神經(jīng)元損傷及氧化性損傷的保護(hù)作用。 結(jié)果表明：蜂斗菜內(nèi)酯Ⅰa-Ⅴa在25-1

3、00μg/mL濃度下,能明顯提高受損神經(jīng)元的細(xì)胞活力,減少乳酸脫氫酶(LDH)釋放,并能明顯對(duì)抗過(guò)氧化氫、黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶和Fe2+/抗壞血酸誘導(dǎo)的氧化性損傷。提示蜂斗菜內(nèi)酯Ⅰa-Ⅴa均具神經(jīng)保護(hù)活性,并且該活性與其清除氧自由基作用有關(guān)。 HPLC測(cè)定結(jié)果表明,毛裂蜂斗菜根莖蜂斗菜內(nèi)酯D、Ⅴa、B、Ⅳa、Ⅲa的含量依次為0.085％、0.048％、0.18％、0.128％和0.169％,總內(nèi)酯含量為0.610％,地上莖葉及花

4、序中的總內(nèi)酯含量分別為0.121％、0.070％。總內(nèi)酯含量在根莖中最高。 為鑒定毛裂蜂斗菜原植物及藥材,研究了其不同器官根莖、莖、葉及花的組織特征。毛裂蜂斗菜根莖的主要顯微特征為,木栓層由2-3列木栓細(xì)胞組成。皮層散在根跡維管束；木質(zhì)部有較多木纖維；分泌道位于韌皮部外側(cè)。維管束為外韌型維管束,排列成近環(huán)狀。髓較發(fā)達(dá)。 對(duì)毛裂蜂斗菜根莖的有效部位-蜂斗菜總內(nèi)酯進(jìn)行了提取純化工藝研究,確定了最佳制備工藝路線。毛裂蜂斗菜根莖

5、用5倍量的95％乙醇滲漉,總內(nèi)酯的提取率超過(guò)90％,提取較為完全。D-101型大孔樹脂能夠有效吸附蜂斗菜內(nèi)酯,可循環(huán)使用,累計(jì)吸附量在44.33 mg/g以下,對(duì)蜂斗菜內(nèi)酯具有較佳的吸附率,樹脂使用11個(gè)循環(huán)后,需再生,再生10次之后不宜使用。提取液濃縮為濃度為0.8:1～1.9:1(藥材重量：溶液體積)后按0.6BV上樣量通入裝有樹脂的色譜柱中,依次用7BV的60％乙醇、10BV的80％乙醇和8BV的95％乙醇梯度洗脫,流速為2.5