梔子活性成分的提取、分離及轉(zhuǎn)化和功能研究.pdf

1、梔子(Gardenia jasminoides Ellis)又名山梔子,是茜草科桅子屬的一種常綠灌木。其果實(shí)不僅含有豐富的色素成分,被廣泛用作食品添加劑和工業(yè)染料,也是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥,具有利膽消炎的作用,臨床上用于治療膽囊炎、黃疸性肝炎等。本文研究了如何從梔子果實(shí)中同步提取、分離梔子黃色素和梔子苷的方法,以及梔子黃色素和梔子苷的純化和轉(zhuǎn)化工藝條件,并對(duì)梔子黃色素、藏花酸和梔子苷的體外抗氧化能力進(jìn)行了初步的研究。
　　 采用超聲波

2、法提取,確定了梔子黃色素和梔子苷的最佳提取工藝條件為:提取溶劑為40％乙醇溶液,提取時(shí)間40min,提取溫度60℃。同時(shí)以溶劑用量、提取率、得率和色素質(zhì)量為指標(biāo),對(duì)浸提法、超聲波法和超聲波逆流法的提取效果進(jìn)行比較,結(jié)果表明,超聲波逆流法的提取效果較好。
　　 采用大孔樹(shù)脂精制梔子黃色素,通過(guò)靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)和動(dòng)態(tài)洗脫實(shí)驗(yàn),篩選出LD605、D3520、D4020大孔樹(shù)脂對(duì)梔子黃色素的精制效果較好,經(jīng)LD605樹(shù)脂精制后的梔子黃色素色

3、價(jià)達(dá)到432,OD比值為0.49,得率1.12％。采用膜分離法精制梔子黃色素,提取液經(jīng)陶瓷膜微濾和有機(jī)膜超濾分離后,精制的梔子黃色素色價(jià)達(dá)到209,OD比值為0.52,得率2.53％。同時(shí)對(duì)梔子黃色素穩(wěn)定性的影響因素進(jìn)行了研究,結(jié)果表明,梔子黃色素在溫度大于80℃的條件下易發(fā)生氧化,并且精制后的色素更易降解。采用堿解法對(duì)精制后的梔子黃色素進(jìn)行水解轉(zhuǎn)化,得到的藏花酸通過(guò)甲醇除雜,重結(jié)晶后,經(jīng)高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)含量達(dá)到98.43％

4、,得率8.42％。
　　 采用H103大孔樹(shù)脂對(duì)梔子黃色素精制廢液中的梔子苷進(jìn)行富集分離,得到的梔子苷經(jīng)HPLC檢測(cè)含量達(dá)到50.75％,得率3.64％。采用硅膠吸附層析法分離純化梔子苷,正丁醇作為流動(dòng)相,得到的梔子苷經(jīng)HPLC檢測(cè)含量達(dá)到91.77％,回收率44.94％。采用中壓層析柱制備梔子苷,乙酸乙酯-甲醇(3:1,v/v)作為流動(dòng)相,分離得到的梔子苷再用乙酸乙酯一甲醇溶劑體系進(jìn)行重結(jié)晶,最終得到的梔子苷經(jīng)HPLC檢測(cè)含量

5、達(dá)到88.00％,梔子苷回收率57.81％。采用高速逆流色譜法(HSCCC)分離制備梔子苷,以正丁醇-水(1:1,v/v)作為兩相溶劑系統(tǒng),得到的梔子苷經(jīng)HPLC檢測(cè)含量達(dá)到92.81％,回收率74.88％。使用β-葡萄糖苷酶對(duì)純化的梔子苷進(jìn)行酶解,用比色法和HPLC法檢測(cè),確定了β-葡萄糖苷酶水解梔子苷的最適條件:pH5.0,溫度50℃,水解時(shí)間40min,加酶量913.63U/g。
　　 以羥自由基(·OH)清除率,超氧陰離