小檗堿抗高糖高胰島素誘導(dǎo)心肌肥大與PPARα-NO信號通路關(guān)系研究.pdf

1、目的:本研究擬利用高糖高胰島素(High glucose and insulin,HGI)誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大模型,模擬糖尿病時(shí)體內(nèi)高糖高胰島素環(huán)境,研究過氧化物酶體增殖物激活受體-α(Peroxisome proliferator-activatedreceptor-α,PPARα).一氧化氮(Nitric oxide,NO)信號通路在糖尿病心肌肥大中的作用；并采用中藥黃連主要活性成分小檗堿(Berberine,BBR)進(jìn)行干預(yù),探討B(tài)B

2、R在糖尿病心肌肥大中的作用及其可能機(jī)制。
　　 方法:利用乳鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng),以細(xì)胞表面積、蛋白含量和心房利鈉因子mRNA表達(dá)為心肌肥大反應(yīng)指標(biāo),觀察HGI(葡萄糖25.5mmol·L-1+胰島素0.1μmol·L-1)誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大作用及BBR的影響。Real time RT-PCR和Western blot方法、比色法和硝酸還原法分別檢測mRNA和蛋白水平的表達(dá),以及一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase,

3、NOS)活性和NO濃度。
　　 結(jié)果:HGI明顯誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大,細(xì)胞直徑、蛋白含量和心房利鈉因子mRNA表達(dá)均明顯增加(P<0.01),但PPARot以及內(nèi)皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)mRNA和蛋白的表達(dá)降低(P<0.05),NOS活性和N0濃度亦隨之減少(P<0.01)。PPARα激動(dòng)劑非諾貝特(Fenofibrate,FF)明顯抑制HGI誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大

4、,并上調(diào)PPARα以及eNOS的表達(dá),同時(shí)增加NOS活性和NO濃度(P<0.01)。其阻斷劑MK886可完全阻斷FF的上述作用(P<0.01)。NO前體L-精氨酸(L-Arginine,L-Arg)作用與FF相似,NOS抑制劑NG-硝基-L-精氨酸-甲酯(NG-nitro-L-Arginine-methyl ester,L-NAME)亦可完全阻斷L-Arg的作用(P<0.01)。BBR的作用與FF及L-Arg相似,呈濃度依賴性地(0.1

5、μmol·L-1-100μmol·L-1)抑制HGI誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大,并上調(diào)PPARα-NO信號通路的活性(P<0.05)。MK886可完全阻斷BBR的上述作用(P<0.01),L-NAME則只能部分阻斷(P<0.01)。
　　 結(jié)論:HGI誘導(dǎo)心肌肥大的發(fā)生發(fā)展可能與PPARα-NO信號通路被抑制有關(guān)；BBR具有抗HGI誘導(dǎo)心肌肥大的作用,該作用可能與其激活PPARot-NO信號通路,促進(jìn)eNOS的表達(dá),最終增加NO的釋放有