小檗堿對高糖高脂誘導(dǎo)的NIT-1胰島β細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、本研究分為二部分：第一部分、不同濃度小檗堿對NIT-1胰島β細(xì)胞生長的影響。
　　 目的：探討不同濃度小檗堿對體外培養(yǎng)NIT-1胰島β細(xì)胞生長的影響，并尋求進行體外干預(yù)實驗的合適濃度。
　　 方法：體外培養(yǎng)NIT-1胰島β細(xì)胞株，在培養(yǎng)基中加入不同濃度的小檗堿，培養(yǎng)24小時后，采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法比較加入不同濃度的小檗堿后NIT-1胰島β細(xì)胞生長抑制率的差異。
　　 結(jié)果：MTT結(jié)果顯示，不同濃度小

2、檗堿對NIT-1胰島β細(xì)胞作用呈劑量依賴性：低濃度小檗堿（1μmol/L）對細(xì)胞無明顯毒性（P=0.03），隨濃度升高毒性作用明顯，當(dāng)小檗堿濃度為300μmol/L時，NIT-1胰島β細(xì)胞成活率不到正常組的30%。
　　 結(jié)論：小檗堿對NIT-1胰島β細(xì)胞毒性作用呈劑量依賴性：低濃度小檗堿（1μmol/L）對細(xì)胞無明顯毒性，隨濃度升高毒性作用增強。
　　 第二部分、小檗堿對高糖高脂誘導(dǎo)的NIT-1胰島β細(xì)胞凋亡的影響。<

3、br>　　 目的：探討小檗堿對高糖高脂誘導(dǎo)的NIT-1胰島β細(xì)胞凋亡的影響。
　　 方法：采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法比較高糖和（或）高脂環(huán)境對NIT-1胰島β細(xì)胞生長抑制作用，以及同時加入合適濃度的小檗堿后對NIT-1胰島β細(xì)胞的生長抑制的影響，同時應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)（FCA）及原位末端核苷酸標(biāo)記法(TUNEL)檢測不同組中NIT-1細(xì)胞凋亡率。
　　 結(jié)果：MTT結(jié)果顯示單純高糖或高脂培養(yǎng)24h后，并未明顯抑制N

4、IT-1細(xì)胞的生長，而高糖高脂共培養(yǎng)時明顯抑制NIT-1細(xì)胞的生長，細(xì)胞的成活率不到正常組的20%（82.38±0.019 vs 0.00±0.182，P<0.01）。加入小檗堿后，細(xì)胞的成活率提高，與模型組相比有顯著差異（P<0.01），F(xiàn)CA分析結(jié)果表明，與二甲雙胍抗凋亡作用類似，小檗堿改善了高糖高脂誘導(dǎo)的NIT-1胰島β細(xì)胞凋亡（P<0.01），TUNEL檢測結(jié)果亦提示，小檗堿組細(xì)胞凋亡率低于高糖高脂組（P<0.01）。