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1、目的:新近研究表明,L-carnosine可能是與糖尿病有關(guān)的一種保護(hù)因子,為此我們研究L-carnosine在高糖條件下對(duì)體外培養(yǎng)的NIT-1細(xì)胞胰島素分泌功能,細(xì)胞增殖和凋亡的影響及機(jī)制。
方法:1.對(duì)照組(C組:11.1mmol/L Glucose)和高糖組(H組:33.3mmol/L Glucose)對(duì)NIT-1細(xì)胞分別培養(yǎng)72h,放射免疫法測(cè)定在不同濃度糖和L-carnosine刺激下胰島素分泌。
2、2.NIT-1細(xì)胞分四組:C(11.1mmol/L Glucose)、H(33.3mmol/L Glucose)、H+A(33.3mmol/L Glucose+1mmol/L L–carnosine)、H+B(33.3mmol/L Glucose+20 mmol/L L-carnosine),分別培養(yǎng)72h,BRDU檢測(cè)細(xì)胞增殖率,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其凋亡率,RT-PCR測(cè)定bcl-2和caspase-3mRNA的表達(dá)。
結(jié)果
3、1.胰島素釋放:與C組相比較,H組整體水平下降;不同的刺激物下,C組和H組均為:無(wú)葡萄糖時(shí),20mmol/L與0mmol/L L-carnosine刺激下相比顯著增加(P<0.01)。
2.細(xì)胞增殖率:H組較C組增加了63.59%±3.7%(P<0.01),H+A組較H組增加了23.44%±6.08%(P<0.01),H+B組較H組增加不明顯(P>0.05);凋亡率:H組較C組增加了75.15%±7.61%(P<0.01)
4、,H+A組較H組減少了58.17%±6.92%(P<0.01),H+B組較H組也明顯減少(P<0.01),但仍高于H+A組;
3.caspase-3mRNA的表達(dá):H組較C組明顯增加(P<0.05),H+A組與H組比較明顯減少(P<0.05),H+B組與H組相比減少不明顯(P>0.05);bcl-2mRNA的表達(dá):H組較C組明顯減少(P<0.05),H+A組較H組明顯增加(P<0.01),H+B組較H組增加不明顯(P>0.
5、05)。
結(jié)論:1.長(zhǎng)期高糖條件能使NIT-1細(xì)胞胰島素分泌功能受損,L-carnosine在高濃度時(shí)可以單獨(dú)刺激NIT-1細(xì)胞胰島素的釋放。
2.長(zhǎng)期高糖條件下NIT-1細(xì)胞增殖凋亡均增加,但總體數(shù)量減少;低濃度的L-carnosine長(zhǎng)期作用于NIT-1細(xì)胞可以增加其增殖減少凋亡,使總體數(shù)量增多;
3.caspase-3和bcl-2基因可能參與了高糖誘導(dǎo)NIT-1細(xì)胞的增殖與凋亡過(guò)程以及L-
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