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文檔簡介
1、 目的:通過觀察低密度脂蛋白(LDL)對體外培養(yǎng)Wistar大鼠胰島細胞分泌功能的影響及誘導的胰島細胞凋亡作用的實驗研究,來探討低密度脂蛋白對體外培養(yǎng)胰島細胞的毒性作用及可能機制。 方法:1、以Wistar大鼠胰島細胞為對象,膠原酶分次短時間消化胰腺組織,細胞接種24小時后轉板繼續(xù)培養(yǎng),放射免疫法檢測培養(yǎng)液中胰島素及葡萄糖刺激下胰島素分泌量,進行胰島細胞生物學活性鑒定,倒置顯微鏡下動態(tài)觀察胰島細胞生長情況。2、不同濃度LD
2、L作用體外培養(yǎng)胰島細胞48小時,放射免疫法檢測各組細胞胰島素分泌量的變化。3、采用電鏡觀測、DNA片段化檢測等方法,觀察LDL誘導的胰島細胞的凋亡。 結論:1、用凝膠酶反復短時間消化胰腺組織,細胞接種后及時轉板的方法可獲得純度較高、生長良好、適合實驗研究的胰島單層細胞。2、LDL對體外培養(yǎng)的大鼠胰島細胞分泌功能有一定的影響,影響程度與LDL濃度有關,表現為LDL抑制高糖刺激下的胰島素分泌,并且這種抑制作用隨濃度增加而加強,呈劑量依
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