載脂蛋白J對(duì)氧化低密度脂蛋白引起的心肌細(xì)胞損傷的影響.pdf

1、現(xiàn)如今心血管疾病頻發(fā)，已成為制約人們健康的一大難題。心血管疾病類型眾多，高頻發(fā)的疾病包括缺血性心肌病、高血壓以及動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)等。通過(guò)調(diào)查，多數(shù)的心血管疾病和AS之間均有密切的關(guān)聯(lián)。國(guó)內(nèi)外業(yè)界人士從未停止過(guò)對(duì)冠心病的研究，據(jù)最新調(diào)研結(jié)果顯示，多數(shù)不必要的活性氧自由基(reactive oxygen species，ROS)是種種冠心病產(chǎn)生因素都可以激發(fā)的，活性氧進(jìn)而會(huì)產(chǎn)生誘發(fā)AS的病理過(guò)程。氧化低密

2、度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL)的功能多樣，不但可損傷血管內(nèi)皮、誘發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子，而且會(huì)同時(shí)造成細(xì)胞凋亡。
　　載脂蛋白J(Apolipoprotein-J，ApoJ)是多存于人體組織與體液中的新型多功能分泌型的糖蛋白質(zhì)。它既可參與精子成熟、組織重構(gòu)、和補(bǔ)體活化的調(diào)控等生理病理過(guò)程，又可在細(xì)胞凋亡和脂質(zhì)運(yùn)輸中發(fā)揮作用。載脂蛋白J在抑制凋亡細(xì)胞方面有顯著作用，因此可保護(hù)心

3、臟受損時(shí)的細(xì)胞。但是值得注意的是，即使載脂蛋白J與ox-LDL二者之間存在的聯(lián)系對(duì)于心肌細(xì)胞的生長(zhǎng)與死亡起著決定性的作用，仍未完全引起足夠的重視。
　　目的:闡明ox-LDL對(duì)心肌細(xì)胞的影響及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，并探討高表達(dá)ApoJ是否可降低ox-LDL對(duì)新生大鼠心室肌細(xì)胞(neonatal rat ventricular cells，NRVCs)的影響。
　　方法:利用帶有ApoJ基因的腺病毒感染NRVCs使ApoJ高表達(dá)

4、。用CaMKⅡ抑制劑KN93和SOD類似物Mn(Ⅲ)TBAP進(jìn)行前期預(yù)處理，劃分心肌細(xì)胞為:正常對(duì)照組、ox-LDL組、ox-LDL聯(lián)合ApoJ組、ApoJ組、ox-LDL聯(lián)合KN93組、ox-LDL聯(lián)合Mn（Ⅲ）TBAP組、H2O2組、H2O2+ApoJ組。通過(guò)MTT檢測(cè)法和Caspase-3/7活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)心肌細(xì)胞活性和凋亡變化;利用Western-blot檢測(cè)心肌細(xì)胞Nox2/gp91phox、P47和CaMKⅡ表達(dá)情況，利

5、用CaMKⅡ活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)心肌細(xì)胞CaMKⅡ活性。
　　結(jié)果:ox-LDL可引起細(xì)胞損傷，具體表現(xiàn)為caspase3/7活性增加，caspase-3的表達(dá)增強(qiáng)以及細(xì)胞活性下降。而APOJ高表達(dá)能夠顯著降低ox-LDL造成的細(xì)胞損傷。ox-LDL能夠增加ROS的產(chǎn)生，具體表現(xiàn)為Nox2/gp91phox和P47表達(dá)升高，而ApoJ可以抑制ox-LDL的表達(dá)。此外，APOJ高表達(dá)能夠降低ox-LDL引起的CaMKⅡ表達(dá)，同時(shí)顯著抑

6、制ox-LDL介導(dǎo)的CaMKⅡ活性上調(diào)。CaMKⅡ抑制劑KN93降低ApoJ抗氧化作用，阻礙APOJ對(duì)ox-LDL損傷的保護(hù)作用。活性氧清除劑(ROS)Mn(Ⅲ)TBAP也弱化了CaMKⅡ的表達(dá)和ox-LDL誘導(dǎo)的活性增加，并通過(guò)減弱ox-LDL誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷顯示出與ApoJ類似的結(jié)果。
　　結(jié)論:1.ApoJ可減少ox-LDL誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡，減輕心肌細(xì)胞損傷;2.ox-LDL能利用氧化應(yīng)激，通過(guò)ROS/oxCaMKⅡ通路引起