?；撬釋?duì)氧化低密度脂蛋白致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:探討牛磺酸(Tau)對(duì)氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)引起的血管內(nèi)皮細(xì)胞(ECs)凋亡及一氧化氮分泌的影響。
　　方法:采用體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(ECV304)為對(duì)象,研究了ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和一氧化氮分泌的影響及牛磺酸的干預(yù)作用。實(shí)驗(yàn)分為兩部分:第一部分研究ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的損傷作用。實(shí)驗(yàn)分為四組,即空白對(duì)照組,ox-LDL處理組(25mg/L,50mg/L和100mg/L);第二部分研究?；撬釋?duì)ox

2、-LDL損傷內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)分為6組,即空白對(duì)照組、ox-LDL(50mg/L)組及分別加入含有不同濃度的?；撬?5、10、20與40mmol/L)的干預(yù)組。內(nèi)皮細(xì)胞活性的檢測(cè)應(yīng)用MTT法,細(xì)胞凋亡的檢測(cè)應(yīng)用TUNEL法和流式細(xì)胞術(shù),一氧化氮含量的測(cè)定應(yīng)用硝酸還原酶法。
　　結(jié)果:一 、ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞活性及細(xì)胞凋亡的影響
　　1.經(jīng)不同濃度的ox-LDL作用24小時(shí)后,內(nèi)皮細(xì)胞的活性呈濃度依賴性的下降, ox

3、-LDL(25mg/L,50mg/L、100mg/L)處理組細(xì)胞活性分別為對(duì)照組的81％(P<0.05)、72%(P<0.01)、59%(P<0.01)。
　　2.經(jīng)不同濃度的ox-LDL作用24小時(shí)后,內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡率呈濃度依賴性的增加,ox-LDL(25mg/L,50mg/L、100mg/L)處理組內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率分別為空白對(duì)照組的11.7倍(P<0.01)、16.9倍(P<0.01)、22.3倍(P<0.01)。
　　二

4、、?；撬釋?duì)ox-LDL引起的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡及一氧化氮合成的影響
　　1.?；撬釋?duì)ox-LDL引起的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響
　　經(jīng)ox-LDL(50mg/L)處理24小時(shí)后,細(xì)胞凋亡率明顯上升(細(xì)胞凋亡率為25.50±2.10% versus1.37±0.15% P<0.01)。牛磺酸則在一定范圍內(nèi)呈濃度依賴性的拮抗ox-LDL(50mg/L)所致的內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果示:5、10、20與40mmol/L?；撬?/p>

5、使內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡率分別下降為ox-LDL(50mg/L)處理組的89%(P<0.05)、65%(P<0.01)、49%(P<0.01)、44%(P<0.01)。應(yīng)用TUNNEL法檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡率的結(jié)果基本同流式細(xì)胞術(shù)的相吻合,5、10、20及40mmol/L?；撬崽幚斫M血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率分別下降至ox-LDL(50mg/L)處理組的84%(P<0.05)、57%(P<0.01)、40%(P<0.01)、38%(P<0.01)。

6、>　　2.牛磺酸對(duì)ox-LDL引起的血管內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成的影響
　　經(jīng)ox-LDL(50mg/L)處理24小時(shí)后,血管內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮的合成明顯降低(濃度為1.193±0.004versus1.828±0.015P<0.01)。?；撬岣深A(yù)組(5、10、20、40mmol/L)內(nèi)皮細(xì)胞合成NO均增加,分別為ox-LDL(50mg/L)組的1.20倍(P<0.05)、1.32倍(P<0.05)、1.44倍(P<0.05)、1.46