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文檔簡介
1、目的:探討艷山姜揮發(fā)油(EOAZ)對氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。
方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC),并進(jìn)行傳代,實(shí)驗(yàn)分為8組,分別為空白對照組(control組)、模型組(OX-LDL組)、EOAZ高劑量組(HD組)、EOAZ中劑量組(MD組)、EOAZ低劑量組(LD組)和普伐他汀組(PRA組)、阿司匹林組(ASP組)、卡維地洛組(CAR組),通過倒置相差顯微鏡、蘇木素-伊紅染色(H
2、E染色)及吉姆薩染色來觀察EOAZ對HUVEC形態(tài)的影響;采用四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)檢測體外培養(yǎng)HUVEC增值活性,臺(tái)盼藍(lán)拒染檢測死亡率,測定培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活力分析細(xì)胞的損傷程度;檢測培養(yǎng)液中一氧化氮(NO)的含量及細(xì)胞內(nèi)總一氧化氮合酶(tNOS)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的活性來分析NO-NOS的變化;檢測細(xì)胞內(nèi)丙二醛(MDA)的含量、還原型谷胱甘肽(GSH)的含量、超氧化
3、物歧化酶(SOD)的活性、過氧化氫酶(CAT)的活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的活性及總抗氧化能力(T-AOC),來分析EC氧化應(yīng)激(OS)狀態(tài)。
結(jié)果:與空白對照組比較,OX-LDL100mg/L孵育HUVEC24 h后,可見細(xì)胞間隙增寬、形態(tài)不規(guī)則、胞膜皺縮、胞核皺縮、部分細(xì)胞脫落;細(xì)胞增殖活力顯著降低,細(xì)胞死亡率增高,LDH的漏出量增加;NO的分泌量顯著減少,tNOS、eNOS活性明顯降低,而iNOS活性未見明
4、顯變化;MDA含量明顯增高,GSH含量顯著降低,SOD、CAT、GSH-PX的活性顯著降低,T-AOC顯著降低。EOAZ作用后,與OX-LDL組比較,細(xì)胞形態(tài)接近正常;HUVEC MTT值升高,細(xì)胞死亡率降低,培養(yǎng)液LDH的活力降低;NO的分泌量升高,tNOS、eNOS活性升高;MDA含量降低,GSH含量升高,SOD、CAT、GSH-PX活性升高,T-AOC升高。
結(jié)論:①OX-LDL誘導(dǎo)HUVEC損傷可能與NO-NOS功能改
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