鹽酸小檗堿對葡萄糖、氧化型低密度脂蛋白、胰島素聯(lián)合誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的干預(yù)作用.pdf

1、目的:觀察鹽酸小檗堿(Ber)對葡萄糖(Glu)、胰島素(Ins)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)聯(lián)合誘導(dǎo)下血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的干預(yù)作用并初步探討其作用機(jī)制。方法:人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株 HUVEC體外培養(yǎng)24小時貼壁后,以Glu(40mmol/L)、Ins(20mU/L)、ox-IDL(20mg/L)聯(lián)合作用48小時,建立2型糖尿病血管并發(fā)癥的體外內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型。在此基礎(chǔ)上觀測不同濃度的鹽酸小檗堿(100、75、50、25、10μg/m

2、l)對該細(xì)胞損傷模型的調(diào)節(jié)作用,并建立陽性對照卡托普利組(50μg/ml)和陰性對照正常組。各試驗組細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)48小時后分別檢測細(xì)胞活性、增殖率及其細(xì)胞培養(yǎng)液中的內(nèi)皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、腫瘤壞死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的含量。結(jié)果:1)細(xì)胞增殖率:在Glu、Ins、ox-LDL混合條件液損傷下,模型組細(xì)胞增殖率0.472±0.113較正常組0.974±0.032明顯下降(P<0

3、.01),說明造模成功。治療各組0.899±0.073、0.843±0.123、0.723±0.124、0.688±0.131、0.638±0.095及卡托普利組0.603±0.087可明顯改善內(nèi)皮細(xì)胞的活性,與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),并有一定的劑量依賴性,其中治療1-4組作用強(qiáng)于卡托普利組(P<0.01及0.05)。2)NO:NO含量模型組9.881±2.082μmol/L較正常組54.047±3.946μmol/L明

4、顯降低(P<0.01),Ber各治療組73.724±4.404、67.958±2.573、64.370±4.342、57.013±3.721、55.176±2.410μmol/L及卡托普利組66.258±2.118μmol/L可明顯提高NO的釋放,與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),并有一定的劑量依賴性,其中治療1組作用強(qiáng)于卡托普利組(P<0.01)。3)ET-1:ET-1模型組60.240±3.058 ng/L較正常組38.10

5、1±2.911ng/L顯著升高(P<0.01),Ber治療各組39.412±2.890、45.656±2.984、48.976±2.914、52.292±1.254、56.373±1.099ng/L及卡托普利組45.337±2.971ng/L可明顯抑制 ET-1的釋放,與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),并有一定的劑量依賴性,其中治療1組作用強(qiáng)于卡托普利組(P<0.01)。4)SOD:SOD模型組16.221±1.401U/ml較

6、正常組35.78±1.497顯著降低(P<0.01),Ber治療各組32.515±2.231、29.718±2.306、26.186±1.729、23.643±1.008、22.704±1.948及卡托普利組26.897±1.688可明顯提高SOD含量,并有一定的劑量依賴性,與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),其中治療1,2組作用強(qiáng)于卡托普利組(P<0.01)。5)IL-6:IL-6模型組169.258±14.756pg/ml較正

7、常組36.840±3.578pg/ml顯著升高(P<0.01),Ber各治療組42.635±6.216、60.417±8.593、70.593±7.019、81.195±4.204、85.937±9.073pg/ml,卡托利普組70.069±9.740 pg/ml,可明顯降低 IL-6的濃度,并有一定的劑量依賴性,與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),其中治療1、2組作用強(qiáng)于卡托普利組(P<0.01)。6)TNF-α:TNF-α模型

8、組517.800±24.092 pg/ml較正常組343.096±18.677 pg/ml明顯升高(P<0.01),Ber治療各組381.232±16.415、405.032±28.508、431.564±26.942、469.789±15.007、494.615±21.203 pg/ml及卡托利普組517.800±24.092 pg/ml可明顯降低 TNF-α的濃度,并有一定的劑量依賴性,與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),其中