川陳皮素對(duì)高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:
　　 近年來(lái),糖尿病(DM)發(fā)病率和死亡率日益升高,其中心血管并發(fā)癥是導(dǎo)致DM患者死亡的主要原因之一。DM導(dǎo)致心血管疾病的機(jī)制是復(fù)雜的,其中血管內(nèi)皮功能紊亂是發(fā)生心血管并發(fā)癥的重要因素。因此,如何保護(hù)血管內(nèi)皮成為對(duì)抗DM心血管并發(fā)癥的新的研究靶點(diǎn)。川陳皮素是從橘皮中提取得到的一種黃酮類化合物,具有抗血細(xì)胞凝集、抗血栓形成、抗真菌、抗炎、抗過(guò)敏、抗癲癇等功效。但是,川陳皮素能否對(duì)抗高糖誘導(dǎo)下的內(nèi)皮細(xì)胞損傷,目前國(guó)內(nèi)外未見相

2、關(guān)研究。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human Umbilical VascularEndothelial Cells,HUVEC)建立高糖損傷內(nèi)皮細(xì)胞模型,探討川陳皮素對(duì)高糖誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。
　　 方法:
　　 本實(shí)驗(yàn)所用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)由山東大學(xué)附屬山東省立醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室提供,選擇生長(zhǎng)良好的HUVECs用于試驗(yàn)。試驗(yàn)分組為:①正常對(duì)照組:用含有10％胎牛血清的R

3、PMI-1640完全培養(yǎng)液和終濃度為5.5 mmol/L的葡萄糖,與內(nèi)皮細(xì)胞共同培養(yǎng)48h;②高糖組(HG):用含有10％胎牛血清的RPMI-1640完全培養(yǎng)液和終濃度為30mmol/L的葡萄糖,與內(nèi)皮細(xì)胞共同培養(yǎng)48h;③高糖+川陳皮素組:用含有不同終濃度的川陳皮素(40μ mol/L、20μ mol/L、10μmol/L、5μ mol/L、2.5μmol/L,分別為標(biāo)為A組、B組、C組、D組、E組)和內(nèi)皮細(xì)胞預(yù)處理18h,然后加入終

4、濃度為30mmol/L的葡萄糖,繼續(xù)培養(yǎng)48h。在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),進(jìn)行MTT光吸收檢測(cè)法檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞活力,細(xì)胞上清液中SOD活性和NO分泌量測(cè)定。所得數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.HUVECs細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化
　　 正常對(duì)照組細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,貼壁牢,細(xì)胞間連接緊密,細(xì)胞呈多角形或是梭形,邊界清,大小均勻,胞漿豐富,呈單層鋪路石樣排列。高糖組細(xì)胞皺縮,變圓,細(xì)胞體

5、積變小,細(xì)胞間隙增大,邊界不清,并有較多細(xì)胞脫落。高劑量川陳皮素組(A組、B組、C組)與高糖組細(xì)胞相比,細(xì)胞形態(tài)有不同程度的改善,細(xì)胞間隙減小,胞間連接增多,大部分細(xì)胞恢復(fù)呈多角形或梭形。低劑量川陳皮素組(D組、E組)與高糖組比較,細(xì)胞形態(tài)改善不明顯,細(xì)胞體積變小,胞間連接減少,邊界不清,有較多細(xì)胞脫落。
　　 2.川陳皮素對(duì)高糖誘導(dǎo)HUVEC損傷的保護(hù)作用
　　 與正常對(duì)照組相比,高糖組HUVEC細(xì)胞活力(OD值)、總

6、SOD活力和NO分泌量明顯下降(P均＜0.01),而與高糖組相比,經(jīng)不同濃度的川陳皮素作用后,HUVEC細(xì)胞活力(OD值)、總SOD活力和NO分泌量明顯回升,并與川陳皮素呈濃度依賴性。其中高濃度川陳皮素組(A組、B組、C組)與高糖組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),而低濃度川陳皮素組(D組、E組)與無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),。
　　 結(jié)論:
　　 1.高糖可誘導(dǎo)HUVEC活力下降,活性氧產(chǎn)生增多,抗氧化能力降低,導(dǎo)致