甲醛誘導人臍靜脈內皮細胞的損傷作用及機制.pdf

1、目的：研究甲醛誘導人臍靜脈內皮細胞的損傷作用及其機制，以闡明內源性甲醛在動脈粥樣硬化、糖尿病血管病變等血管內皮功能障礙性疾病中的意義。 方法：以不同濃度的甲醛(0，5，10，20，40，80μmol/L)與HUVEC-12細胞共培養(yǎng)24小時，以過氧化氫為陽性對照組，抗氧化劑維生素C為保護組；以40μmol/L甲醛與HUVEC-12細胞共培養(yǎng)(0，4，12，24，48，72)小時。H-E染色觀察細胞形態(tài)學改變；MTT法檢測細胞生長

2、活性；分光光度法檢測LDH漏出量；硫代巴比妥法檢測細胞上清液中MDA的量；硝酸還原酶法檢測細胞上清液中NO的含量；生化法檢測NOS的活性；免疫細胞化學技術和RT-PCR技術，觀察內皮型一氧化氮合酶和誘生型一氧化氮合酶在蛋白和基因水平的表達。實驗數(shù)據以均數(shù)±標準差((-X)±S)表示，用SPSS10.0進行統(tǒng)計學分析。 結果：甲醛呈濃度和時間依賴性地誘導內皮細胞的形態(tài)學損傷和凋亡，抑制細胞的生長活性，促進細胞乳酸脫氫酶漏出；甲醛呈

3、濃度和時間依賴性地誘導內皮細胞上清液中MDA和NO的生成，24小時達高峰；甲醛呈濃度和時間依賴性地誘導抑制eNOS的活性及其在基因和蛋白水平的表達，誘導iNOS的活性及其在基因和蛋白水平的表達，24小時達高峰。HUVEC-12細胞經100mg/L的VitC預處理30分鐘后，再與40μmol/L甲醛共培養(yǎng)24小時后，與40μmol/L甲醛處理組比較，細胞的形態(tài)學損傷減輕，細胞生長活性增加，細胞乳酸脫氫酶漏出降低；細胞上清液中MDA和NO的