高濃度葡萄糖和氧化低密度脂蛋白誘導血管內(nèi)皮細胞凋亡及凋亡相關(guān)基因的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過對人臍靜脈內(nèi)皮細胞V304的培養(yǎng),研究高濃度葡萄糖誘導血管內(nèi)皮細胞凋亡及其和氧化型低密度脂蛋白協(xié)同誘導凋亡的作用;研究鈣離子拮抗劑對內(nèi)皮細胞凋亡的抑制作用;通過凋亡相關(guān)基因Bcl-2,Caspase,c-myc及p21的表達探討凋亡發(fā)生的機制;進一步揭示糖尿病狀態(tài)下動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的部分機制.方法:1.以人臍靜脈內(nèi)皮細胞株V304為研究對象進行常規(guī)培養(yǎng),分別加入不同濃度葡萄糖.2.光學顯微鏡、相差顯微鏡下觀察內(nèi)皮細胞V3

2、04應(yīng)用不同濃度葡萄糖或/和氧化型低密度脂蛋白作用后細胞形態(tài)的改變;透射電鏡觀察細胞凋亡.3.采用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色(MTT)法觀察不同濃度葡萄糖或/和氧化型低密度脂蛋白對內(nèi)皮細胞V304增殖的影響.4.細胞凋亡小分子量DNA片段凝膠電泳法觀察內(nèi)皮細胞V304凋亡情況;流式細胞術(shù)(FCM)檢測細胞凋亡率、細胞周期以及凋亡相關(guān)基因Bcl-2,Caspase,c-myc,及p21的蛋白表達量.5.激光共聚焦顯微鏡觀察不同濃度葡萄糖

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