高葡萄糖與高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)用對人血管內(nèi)皮細胞凋亡的影響.pdf

1、目的：觀察高葡萄糖和高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)用對人血管內(nèi)皮細胞凋亡的作用效果，并探討其機制。 方法：高糖與高軟脂酸單獨及聯(lián)合作用于人臍靜脈內(nèi)皮細胞 (human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)48小時，應(yīng)用Annexin V/PI雙染流式細胞儀檢測細胞凋亡率，Hoechst33342熒光染色觀察凋亡形態(tài)學(xué)變化，高壓液相色譜聯(lián)合質(zhì)譜檢測細胞內(nèi)神經(jīng)酰胺含量，分光光度法檢測半胱天冬氨酸特異性蛋白

2、酶-3(Cysteinyl aspartate specific protease-3，Caspase-3)活性。 結(jié)果：高糖與高軟脂酸單獨及聯(lián)合應(yīng)用均可導(dǎo)致HUVECs出現(xiàn)凋亡的形態(tài)學(xué)變化。兩者聯(lián)合應(yīng)用時的凋亡率高于各自單用(P<0.05)。細胞內(nèi)神經(jīng)酰胺含量在高糖與高軟脂酸單獨及聯(lián)合應(yīng)用時均較對照組升高(P<0.05)，聯(lián)合應(yīng)用時升高最為明顯(P<0.05)。神經(jīng)酰胺合成酶抑制劑myriocin能顯著降低高糖與高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)

3、用導(dǎo)致的細胞凋亡率(P<0.05)。Caspase-3活性在高糖與高軟脂酸單獨及聯(lián)合應(yīng)用時均較對照組升高，聯(lián)合應(yīng)用時升高最為明顯(P<0.05)。Caspase-3特異性抑制劑zDEVD-fmk能顯著降低高糖與高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)用導(dǎo)致的細胞凋亡率(P<0.05)。神經(jīng)酰胺合成酶抑制劑myriocin能顯著抑制高糖與高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)用導(dǎo)致的Caspase-3活性改變(P<0.05)。 結(jié)論：高糖、高軟脂酸聯(lián)合應(yīng)用能協(xié)同誘導(dǎo)人血管內(nèi)皮細胞