替米沙坦對(duì)高糖環(huán)境人血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù).pdf

1、目的：研究替米沙坦(telmisartan，TEL)在高濃度葡萄糖(high glucose，HG)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVEC)損傷中的作用。探討替米沙坦對(duì)高糖環(huán)境下人血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。 方法：體外培養(yǎng)HUVEC，傳至第三代，實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組，高糖組(33.3mmol/L)，高糖+替米沙坦干預(yù)組(替米沙坦?jié)舛确謩e為1 ×10-8mol/

2、L、1 ×10-7mol/L和1×10-6mol/L)，分別培養(yǎng)2h、12h、24h、36h、48h。MTT法測(cè)定高糖組及高糖+替米沙坦組細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率；選定替米沙坦終濃度1×10-6mol/L，重新將實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、高糖組、高糖+替米沙坦組及替米沙坦對(duì)照組，培養(yǎng)時(shí)間同上，收集每一時(shí)間點(diǎn)培養(yǎng)液上清，黃嘌呤氧化法測(cè)定上清液中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)活力，硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛(Malona

3、ldehyde，MDA)含量，硝酸還原酶法測(cè)定一氧化氮(nitrogen monoxidum，NO)含量，放射性免疫法測(cè)定內(nèi)皮素(endothelin，ET)水平。收集培養(yǎng)24h內(nèi)皮細(xì)胞，蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測(cè)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome pro liferator activated receptors γ,PPAR-γ)蛋白表達(dá)量。 結(jié)果： 1.MTT測(cè)定結(jié)果：培養(yǎng)48h后高糖組細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率明顯

4、升高(P＜0.05)，1×10-6mol/L TEL在12 h到48 h之間可明顯減緩HUVECs生長(zhǎng)抑制率的升高(P＜0.01)；1×10-7mol/L和1×10-8mol/L TEL僅在48h可顯著減緩HUVECs生長(zhǎng)抑制率的升高(P＜0.01)，表明不同濃度TEL均可減緩高糖對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制，1×10-6mol/L TEL在12h即可開始發(fā)揮作用。 2.SOD測(cè)定結(jié)果：各培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)(除2h時(shí)刻)高糖組與空白對(duì)照組相比，高糖

5、組SOD測(cè)定活性明顯降低(P＜0.05)，替米沙坦干預(yù)組SOD測(cè)定值高于高糖組(P＜0.05)，表明高糖可降低SOD活性，替米沙坦可抑制高糖地作用。 3.MDA測(cè)定結(jié)果33：各培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)(除2h時(shí)刻)高糖組與空白對(duì)照組相比，高糖組MDA含量明顯升高(P＜0.05)，替米沙坦干預(yù)組MDA值低于高糖組(P＜0.05)，表明高糖可升高M(jìn)DA含量，替米沙坦可抑制高糖的作用; 4.NO、ET測(cè)定結(jié)果：各培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)(除2h時(shí)刻)高糖

6、組與空白對(duì)照組相比，高糖組NO含量明顯降低，ET含量明顯升高(P＜0.05)，替米沙坦干預(yù)組NO含量高于高糖組，ET低于高糖組(P＜0.05)，表明替米沙可改善坦高糖對(duì)NO、ET的影響。 5.PPAR—γ測(cè)定結(jié)果：實(shí)驗(yàn)24h時(shí)高糖組與空白對(duì)照組相比PPAR-γ含量明顯降低(P＜0.05)，替米沙坦干預(yù)組PPAR-γ含量高于高糖組(P＜0.05)，表明替米沙可改善坦高糖對(duì)PPAR-γ的影響。 結(jié)論：高糖抑制HUVEC生長(zhǎng)，