替米沙坦對高血壓和動脈粥樣硬化血管內皮功能的影響及其機制.pdf

1、背景：高血壓和動脈粥樣硬化(atherosclerosis, AS)是危害人類健康的兩大殺手,在我國心腦血管病發(fā)生和死亡者中,一半以上與高血壓有關,而AS是冠心病、缺血性腦卒中、外周血管疾病等心腦血管疾病的病理基礎。血管內皮功能不全和腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(renin-angiotensin-aldosterone system, RAAS)過度激活是兩者的共同發(fā)病機制。血管內皮功能不全與高血壓密切相關,參與其發(fā)生、發(fā)展和轉歸。同

2、時,它是AS發(fā)生的始動環(huán)節(jié),貫穿于整個心腦血管事件鏈中。因此,逆轉血管內皮不全功能對防治高血壓和AS有著重大臨床價值。
　　近年來研究發(fā)現(xiàn)肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)及其特異性受體即間質-上皮轉化因子(mesenchymal-epithelial transition factor, Met)在保護血管內皮功能方面有重要作用,增加血管局部HGF/Met系統(tǒng)表達可能是逆轉血管內皮功能不全

3、的一個新的治療靶點。過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ)是一類由配體激活的核轉錄因子,激動PPARγ能增加HGF表達、保護血管內皮功能。
　　RAAS過度激活是高血壓和AS發(fā)病的經典機制,并且它本身就能引起血管內皮功能不全,血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(angiotensinⅡtype1 receptor blocker, ARB)已廣泛應用

4、于高血壓、冠心病的治療,大大改善了患者的預后。
　　替米沙坦是一新型的ARB,因其獨特的分子結構使其能選擇性激動PPARγ,并且能保護血管內皮功能,且此作用可能獨立于降壓益處之外。但替米沙坦是否能降低血HGF水平和增加血管局部HGF、Met的表達?其保護血管內皮功能的機制是否與直接激動HGF/Met系統(tǒng)有關?相關文獻未見報道。
　　本研究首先觀察復方替米沙坦對高血壓患者血管內皮功能和血HGF的影響,然后研究替米沙坦對AS模型

5、兔血管內皮功能和主動脈HGF、Met、PPARγ表達的影響,最后探討它對AngⅡ所致兔胸主動脈內皮功能損傷的影響及其機制是否與直接激動HGF/Met系統(tǒng)和(或)PPARγ途徑有關。從而為逆轉血管內皮功能不全、防治高血壓和AS提供新的治療靶點,同時也為進一步開發(fā)治療藥物提供新的思路。
　　目的：觀察復方替米沙坦對高血壓患者血管內皮功能和血HGF的影響,研究替米沙坦對AS模型兔血管內皮功能和主動脈HGF、Met、PPARγ表達的影響,

6、探討它對AngⅡ所致兔胸主動脈內皮功能損傷的影響及其機制是否與直接激動HGF/Met系統(tǒng)和(或)PPARγ途徑有關。
　　方法：(1)66例高血壓患者隨機分為復方替米沙坦組(T組)和復方氯沙坦組(L組),療程為8周。分別統(tǒng)計治療后2周、4周、8周的血壓控制率來評價其降壓療效;分別采用雙抗體夾心法、免疫比濁法、化學法和放射免疫法測定高血壓患者治療8周前后血清HGF、血漿血管性血友病因子(vWF)、血清一氧化氮(NO)和血漿內皮素(E

7、T)水平,并且與20例健康者(正常對照組)比較。(2)27只4月齡雄性新西蘭大白兔隨機分為正常組、AS模型組和替米沙坦組,分別給予常規(guī)飼料喂養(yǎng)、高脂飼料喂養(yǎng)和高脂飼料喂養(yǎng)加替米沙坦(10mg/kg/d)治療12周。12周后收集血清檢測血脂水平,頸動脈插管測定動脈血壓,經皮超聲法檢測腹主動脈血管內皮功能,動脈環(huán)張力離體器官測定法測定離體胸主動脈環(huán)內皮依賴性舒張功能,HE染色和透射電鏡觀察主動脈形態(tài)學改變,免疫組織化學法和Westernbl

8、ot檢測主動脈HGF、Met、PPARγ的表達。(3)制備新西蘭大白兔離體胸主動脈環(huán),將動脈環(huán)分別與溶媒、AngⅡ(0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L)、替米沙坦(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)+AngⅡ(1μmol/L)、SU11274(5μmol/L)+替米沙坦(10μmol/L)+AngⅡ(1μmol/L)、GW9662(10μmol/L)+替米沙坦(10μmol/L)+AngⅡ(1μ

9、mol/L)、SU11274(5μmol/L)+GW9662(10μmol/L)+替米沙坦(10μmol/L)+AngⅡ(1μmol/L)體外孵育6小時后,采用動脈環(huán)張力離體器官測定法分別測定各組動脈環(huán)乙酰膽堿(Ach)誘導的內皮依賴性舒張反應和硝普鈉(SNP)誘導的非內皮依賴性舒張反應。
　　結果：(1)治療8周后兩組收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)均明顯下降(P均<0.01),兩組間血壓控制率無顯著性差別(P均>0.05);

10、與正常對照者相比高血壓患者血清HGF、血漿vWF、血漿ET和ET/NO比值明顯增高、血清NO明顯降低(P均<0.01);治療8周后兩組血清HGF、血漿vWF、血漿ET和ET/NO比值明顯下降,血清NO明顯升高(P均<0.01),兩組血清HGF下降幅度值(△HGF)和血清NO升高幅度值(△NO)無顯著性差別(P均>0.05),而血漿vWF降低幅度值(△vWF)、血漿ET下降幅度值(△ET)和△ET/△NO比值T組明顯高于L組(P均<0.0

11、1);Spearman相關分析顯示:除了L組△vWF與△SBP呈正相關(P<0.01)外,其他血管內皮功能指標變化幅度與降低幅度無相關性。(2)12周高脂飼料喂養(yǎng)成功復制出兔AS模型;與正常組相比,AS模型兔血管內皮功能明顯受損(P均<0.01),主動脈HGF、Met和PPARγ表達明顯降低(P均<0.01);與AS模型組相比,替米沙坦明顯改善AS模型兔血管內皮功能不全、體重和血脂(P均<0.01),明顯減輕AS進展,明顯增加主動脈HG

12、F、Met和PPARγ的表達(P均<0.01)。(3)胸動脈環(huán)與AngⅡ(0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L)共育6h, Ach誘導的內皮依賴性舒張反應明顯受損,并且呈劑量依賴性,以1μmol/L的AngⅡ抑制效果最為顯著(P均<0.01),SNP誘導的非內皮依賴性舒張反應無明顯差別(P均>005);替米沙坦(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)明顯逆轉1μmol/L AngⅡ導致的動脈環(huán) Ach

13、誘導的內皮依賴性舒張反應受損,并且呈劑量依賴性,以10μmol/L替米沙坦逆轉效果最為顯著(P均<0.01);5μmol/L SU11274和10μmol/LGW9662均部分取消了10μmol/L替米沙坦對1μmol/L AngⅡ損傷動脈環(huán)內皮依賴性舒張反應的保護作用(P均<0.01);與10μmol/L GW9662相比,5μmol/L SU11274的作用可能更為明顯(P<0.05)。
　　結論：(1)復方替米沙坦能有效控制

14、高血壓患者的血壓、保護血管內皮功能和降低血HGF水平,其保護血管內皮功能作用獨立于降壓之外,和復方氯沙坦相比,在降壓效果相似的情況下,復方替米沙坦能更大程度降低血vWF和ET水平,提示可能更好地保護血管內皮功能。(2)AS模型兔血管內皮依賴性舒張功能明顯受損,主動脈HGF、Met和PPARγ表達明顯降低;替米沙坦獨立于降壓之外地保護AS模型兔的血管內皮功能、改善血脂代謝和抑制 AS進展,增加主動脈 HGF、Met和PPARγ的表達。(3