替米沙坦對同型半胱氨酸誘導的人內皮細胞血管細胞黏附因子-1的影響及與PPAR-δ的關系研究.pdf

1、目的：
　　觀察替米沙坦對同型半胱氨酸誘導體外培養(yǎng)的人臍靜脈內皮細胞血管細胞黏附分子-1及與單核細胞黏附作用的影響，并探討其在抗炎效應中與過氧化物酶增殖物活化受體-δ的關系。
　　方法：
　　第一部分：1、膠原酶消化法獲得人臍靜脈內皮細胞。2、光學顯微鏡形態(tài)觀察法及免疫細胞化學染色技術鑒定人臍靜脈內皮細胞。
　　第二部分：1、RT-PCR法測VCAM-1mRMA的表達；2、WESTERN BLOTTING法測PP

2、AR-δ蛋白的表達；3、ROSE BENGAL染色法檢測單核細胞－血管內皮細胞黏附水平。
　　結果：
　?。?）倒置相差顯微鏡下可見培養(yǎng)的細胞呈卵圓型或多角形，典型的鋪路石樣排列。經(jīng)兔抗人Ⅷ因子相關抗原多克隆抗體鑒定，細胞內特別細胞質被激發(fā)出紅色熒光。
　　（2）與空白對照組相比，同型半胱氨酸（10-6-10-3mol/l組）呈濃度依賴性地增強了人內皮細胞的血管細胞黏附分子-1mRNA的表達水平（P＜0.01）。

3、>　?。?）與HCY組比較，替米沙坦（10-1000nmol/l組）呈濃度依賴性地顯著降低了同型半胱氨酸誘導人內皮細胞的血管細胞黏附分子-1mRNA表達水平（P＜0.01）。
　?。?）與空白對照組相比，替米沙坦（1-1000nmol/l組）呈濃度依賴性地增強了過氧化物酶增殖物活化受體-δmRNA的表達水平（P＜0.01）。
　?。?）過氧化物酶增殖物活化受體-δ激動劑（GW0742）能夠顯著降低同型半胱氨酸誘導的人內皮細胞

4、血管細胞黏附分子-1mRNA表達水平及其與單核細胞的黏附水平（P＜0.01）。
　?。?）過氧化物酶增殖物活化受體-δ抑制劑GSK0660明顯拮抗了替米沙坦對血管細胞黏附分子-1mRNA表達水平的降低作用及其對內皮細胞核單核細胞黏附水平的抑制作用（P＜0.01）.
　　結論:
　　1通過膠原酶消化法分離，培養(yǎng)，再經(jīng)過光學顯微鏡形態(tài)觀察法及免疫細胞化學染色技術鑒定法確定獲得了高純度的人臍靜脈內皮細胞，且細胞存活率較高。<