高糖環(huán)境下HGF對血管內皮細胞增殖及c-met mRNA表達的影響.pdf

1、目的：研究高糖對人血管內皮細胞(EC304)增殖及HGFmRNA表達的影響及高糖環(huán)境下HGF對人血管內皮細胞增殖及c-metmRNA表達的影響，從而進一步探討糖尿病心血管并發(fā)癥的發(fā)病機理和HGF對糖尿病心血管并發(fā)癥的治療作用。 方法：體外培養(yǎng)EC304。細胞分別培養(yǎng)于不同的條件培養(yǎng)基中，采用MTT方法檢測不同濃度的高糖在不同的作用時間對EC304增殖的影響及高糖環(huán)境下HGF在不同的作用時間對EC304增殖的影響；逆轉錄多聚酶鏈反

2、應(RT-PCR)方法分析高糖在不同的作用時間對HGFmRNA表達水平的影響，高糖及高糖環(huán)境下HGF在不同的作用時間對c-metmRNA表達水平的影響。 結果：EC304在高糖的誘導作用下，6h時各組細胞增殖能力無明顯差別，但隨著作用時間的延長，作用12h時，細胞增殖較對照組明顯增強，且隨著高糖濃度的增加，細胞增殖明顯增強，細胞增殖致24h達高峰，48h細胞增殖被抑制，細胞數量較24h明顯減少，出現抑制細胞增殖的現象，96h時細

3、胞的數量進一步減少，且呈濃度依賴性。HGF組與高糖組相比，6h和12h無明顯差別，作用24h、48h、96h時HGF組細胞增殖旺盛。作用6h，高糖組HGFmRNA的表達與對照組無明顯差別，作用12h，高糖組HGFmRNA的表達較對照組升高，作用24h，HGFmRNA的表達開始降低，隨著作用時間的延長，HGFmRNA的表達逐漸降低，即高糖降低HGFmRNA的表達。作用6h各組c-metmRNA的表達之間無顯著差別，作用12h，高糖組和HG

4、F組c-metmRNA的表達開始升高，較對照組明顯升高，一直持續(xù)到24h達高峰，而在48h和96h時高糖組較對照組和HGF組c-metmRNA表達明顯減少；HGF組同高糖組相比可明顯增加c-metmRNA的表達。 結論：高糖早期(6h)對血管內皮細胞增殖、c-met和HGFmRNA的表達無明顯影響，高糖中期(12h、24h)促進血管內皮細胞增殖、上調c-metmRNA的表達，HGFmRNA的表達12h達高峰，晚期(48h、96h