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1、目的:研究不同濃度的密蒙花提取物(buddleja officinalis extract,BOE)對體外培養(yǎng)的高糖環(huán)境下人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(human retinal capillary endothelial cells,HRCECs)增殖、以及VEGF表達(dá)的影響,為糖尿病視網(wǎng)膜病變藥物防治提供新的思路和理論依據(jù)。
方法:體外培養(yǎng)從角膜移植術(shù)后新鮮人眼球提取的HRCECs,取生長良好的第3-4代細(xì)胞用于實驗,實驗分為低
2、糖對照組、高糖對照組、高糖+不同濃度BOE組,用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測HRCECs的增殖。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測VEGF表達(dá)。
結(jié)果:MTT比色法結(jié)果顯示,高糖對照組與低糖對照組沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),用0.01μg/ml,0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml的密蒙花提取物處理高糖下HRCEC24h,48h,72h與高糖對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),高糖+不同濃度 B
3、OE組之間呈時間和濃度的統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測顯示分別用0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml的密蒙花提取物處理HRCECs,作用48h,采用免疫細(xì)胞化學(xué)實驗檢測 VEGF的表達(dá),對圖片用灰度值掃描顯示隨著藥物濃度的逐漸增高,VEGF的表達(dá)量逐漸減少。
結(jié)論:密蒙花提取物對體外培養(yǎng)的HRCECs的增殖有抑制作用,呈時間和劑量依賴性;通過免疫細(xì)胞化學(xué)實驗證實了密蒙花提
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