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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本文利用體外培養(yǎng)的猴視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(RF/6A)研究O-GlcNAc修飾對(duì)猴視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(RF/6A細(xì)胞)增殖和遷移的影響,探索O-GlcNAc修飾在糖尿病視網(wǎng)膜病變病理改變中的作用。
方法:分別用高糖培養(yǎng)基及50μMPUGNAC處理猴視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞(RF/6A細(xì)胞),利用WesternBlot技術(shù)檢測(cè)RF/6A細(xì)胞內(nèi)總蛋白的O-GlcNAc修飾水平,用CCK-8檢測(cè)RF/6A細(xì)胞的增殖能力,用Tan
2、swell小室檢測(cè)RF/6A細(xì)胞的遷移能力。
結(jié)果:①高糖組RF/6A細(xì)胞內(nèi)總蛋白的O-GlcNAc修飾水平明顯高于正常組和高滲組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),正常組與高滲組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)②與正常組和高滲組相比,高糖環(huán)境下細(xì)胞的遷移增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而細(xì)胞增殖的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),正常組與高滲組相比,細(xì)胞的增殖遷移能力差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。③通過OGA特
3、異性抑制劑PUGNAC(50μM)處理后細(xì)胞內(nèi)O-GlcNAc修飾水平升高。④正常糖環(huán)境下培養(yǎng)的RF/6A細(xì)胞用PUGNAC處理后遷移能力降低,與PUGNAC未處理組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而對(duì)細(xì)胞的增殖的影響差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。高糖環(huán)境下培養(yǎng)的RF/6A細(xì)胞用PUGNAC處理后遷移能力也顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:O-GlcNAc修飾水平可能影響視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移,
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